مرجع تخصصی آب و فاضلاب

رنگ آمیزی گرم : GRAM STAIN

این روش رنگ آمیزی یکی از مهمترین ومتداولترین روشهای رنگ آمیزی درباکتری شناسی است که اولین بار توسط کریسین گرم ابداع شد . دراین رنگ آمیزی باکتریها بر مبنای رنگ باکتری پس ازرنگ آمیزی به دودسته گرم مثبت وگرم منفی تقسیم می شوند . رنگ باکتری پس ازرنگ آمیزی به توانایی حفظ رنگ اول وبه عبارتی به ساختمان دیواره سلولی باکتری بستگی دارد . دررنگ آمیزی گرم باکتریهای گرم مثبت پس ازرنگ آمیزی به رنگ بنفش وباکتری های گرم منفی به      رنگ قرمز مشاهده می شود

مکانیسم :

1- رنگ کریستال ویوله رابه مدت 30تا45 ثانیه برروی گسترش ریخته درنتیجه همه باکتری ها بهرنگ بنفش درخواهد درآمد

2- پس از شستشو گسترش با آب به مدت 30تا45 ثانیه بالوگل می پوشانند لوگل باکریستال ویوله ترکیب شده وایجاد کمپلکس های بزرگی می نمایید که باعث تثبیت رنگ کریستال ویوله درداخل دیواره سلولی باکتری می شود . پس ازاین مرحله نیزکماکان همه باکتریها به رنگ بنفش مشاهده می شوند .

مرحله رنگ زدایی مهمترین مرحله رنگ آمیزی است دراین مرحله پس از شستشو لام با آب لام به مدت 15 تا20 ثانیه در معرض موادرنگ زدا مانند الکل استون قرار می گیرد سپس با آب مورد شستشو قرار می گیرد  . درباکتریهای گرم منفی که دارای لایه های پپتیدو گلیکان محدود وغشای خارجی غنی از چربی هستند این حلال باعث حذف این لایه ها وغشا می گردد وباکتری رنگ مراحل قبل راازدست می دهد . ولی درباکتریهای گرم مثبت به علت تعداد زیاد لایه های پپتیدوگلیکان وعدم وجود لیپید فراوان در غشا رنگ مرحله قبل ازغشا خارج نمی شود .درنتیجه پس ازاین مرحله باکتریهای گرم منفی بی رنگ ولی باکتریهای گرم مثبت کماکان بنفش باقی خواهند ماند .

4- در انتها سطح گسترش راباسافرانین یا فوشین (قرمز رنگ) به مدت 30 تا45 ثانیه می پوشانیم سپس باآب شستشو داده و پس از خشک شدن بامیکروسکوپ مورد بررسی قرار میگیرد . دراین مرحله باکتریهای بی رنگ به رنگ قرمز درمی آیند وباکتری های بنفش بدون تغییر رنگ باقی می مانند .

Gram stain of Staphylococcus aureus

Gram stain of Escherichia coli

 

رنگ آمیزی گرم

یک نوع رنگ آمیزی افتراقی است که اولین بار توسط کریستین گرم کشف شد. این روش مفید ترین روش برای تشخیص و درمان میکروب ها به شمار می آید. بر این اساس، باکتری ها را به دو دسته گرم مثبت و گرم منفی تقسیم می کنند.

 

روش کار

 

الف) تهیه گسترش

 

ب) خشک کردن

 

ج) فیکس کردن

 

د) رنگ آمیزی: در این مرحله رنگ کریستال ویوله را به مدت یک دقیقه روی نمونه می ریزیم و بعد شست و شو می دهیم. در این مرحله همۀ باکتری ها به رنگ بنفش در می آیند.

 

ﮬ) استفاده ار لوگل: لوگل را به مدت یک دقیقه روی نمونه می ریزیم و بعد شست و شو می دهیم. این محلول نقش تثبیت رنگ کریستال ویوله  را دارد و در دیواره باکتری تشکیل کمپلکس کریستال ویوله-ید (CVI) را می دهد.

 

و) استفاده از الکل استن یا اتیل الکل: این محلول رنگ بر است. این محلول را به مدت 10 تا 20 ثانیه روی نمونه می ریزیم و بعد شست و شو می دهیم. این محلول دو نقش مهم دارد. اول اینکه حلال چربی هست و دوم اینکه دهیدرات کنندۀ پروتئین هاست.

دیوارۀ باکتری های گرم مثبت تشکیل شده از پپتیدوگلیکان و مقدار کمی لیپید است. وقتی که محلول رنگ بر استفاده می کنیم، چربی ها را در داخل خودش حل می کند و یک سری منافذ در دیواره ایجاد می کند. چون گرم مثبت ها چربی کمی در دیواره شان دارند، منافذ کمی در دیواره شان ایجاد می شود که این منافذ با عمل دهیدراته کردن پروتئین ها بسته می شوند. در نتیجه کمپلکس کریستال ویوله-ید حفظ می شود و رنگ باکتری بنفش می ماند. اما باکتری های گرم منفی چون در دیواره شان چربی زیادی دارند، در اثر استفده از الکل منافذ زیادی در دیواره شان ایجاد می شود که این منافذ با دهیدراته کردن پروتئین ها بسته نمی شوند و باکتری طی عمل رنگ بری بی رنگ می شود

 

ر) استفاده ار سافرانین یا فوشین: این محلول را به مدت یک دقیقه روی نمونه می ریزیم و بعد شست و شو می دهیم. در طی این مرحله باکتری هایی که بی رنگ شده اند به رنگ صورتی تا قرمز در می آیند. یعنی در واقع اختلاف باکتری های گرم مثبت و گرم منفی به تراوایی بیشتر باکتری های گرم منفی به الکل است.

واژه CLAS  برای رنگ آمیزی گرم به  رمز این روش معروف میباشد

C رنگ کریستال ویوله

L لوگول

A استون الکل

S سافرانین

مواد شيميايي منعقدکننده و کمک منعقدکننده - جمعه پانزدهم دی ۱۳۹۱
هشتمين نمايشگاه بين‌المللي صنعت آب و تاسيسات آب و فاضلاب ايران - جمعه هشتم دی ۱۳۹۱
گندزدايی - جمعه یکم دی ۱۳۹۱
روش های تعیین محل ایستگاه ها برای پمپاژ آب - سه شنبه بیست و هشتم آذر ۱۳۹۱
پارامترهای اصلی تعیین کننده کیفیت آب - یکشنبه بیست و ششم آذر ۱۳۹۱
در رأی گیری برای انتخاب شعار نهایی روز جهانی آب سال 2013 شرکت کنید - شنبه بیست و پنجم آذر ۱۳۹۱
هوادهي در تصفيه آب شهري - چهارشنبه بیست و دوم آذر ۱۳۹۱
سرامیک هایی که بدون دخالت مواد شیمیایی آب را تصفیه می کنند - پنجشنبه شانزدهم آذر ۱۳۹۱
اسمز معکوس - چهارشنبه پانزدهم آذر ۱۳۹۱
اولين همايش ملي حفاظت و برنامه ريزي محيط زيست - سه شنبه چهاردهم آذر ۱۳۹۱
اولين همايش حفاظت از تالاب ها واكوسيستم هاي آبي - سه شنبه چهاردهم آذر ۱۳۹۱
الكترودياليز - چهارشنبه هشتم آذر ۱۳۹۱
كنفرانس ملي مديريت سيلاب - دوشنبه ششم آذر ۱۳۹۱
اولين كنفرانس ملي هيدرولوژي مناطق نيمه خشك - دوشنبه ششم آذر ۱۳۹۱
نانوفوتوكاتاليست - چهارشنبه یکم آذر ۱۳۹۱
اولین همایش تصفیه آب و پساب های صنعتی - سه شنبه سی ام آبان ۱۳۹۱
روش های تصفیه پساب صنعتی - دوشنبه بیست و نهم آبان ۱۳۹۱
آشنایی با سیستم فاضلابی پوش فیت - دوشنبه بیست و دوم آبان ۱۳۹۱
تعیین دوره مطلوب فعالیتهای نت پیشگیرانه - یکشنبه بیست و یکم آبان ۱۳۹۱
تصفیه خانه شهرک صنعتی جهان آباد میبد - جمعه نوزدهم آبان ۱۳۹۱
اثرات ازت و فسفر موجود در فاضلابها در محیط زیست - جمعه نوزدهم آبان ۱۳۹۱
تصفیه خانه فاضلاب بیمارستان شهدای کارگر - جمعه نوزدهم آبان ۱۳۹۱
برکه تثبیت یزد - جمعه نوزدهم آبان ۱۳۹۱
تصفیه پسماندهای نیروگاهی - جمعه نوزدهم آبان ۱۳۹۱
شیرهای کنترل - دوشنبه پانزدهم آبان ۱۳۹۱
محیط های کشت میکروبیولوژی - پنجشنبه یازدهم آبان ۱۳۹۱
استقرار و پیاده سازی نظام نگهداری و تعمیرات پیشگیرانه تاسیسات آب - دوشنبه هشتم آبان ۱۳۹۱
مديريت اموال (دارايي) در شركت هاي آب و فاضلاب - دوشنبه یکم آبان ۱۳۹۱
همايش ملی علوم مهندسي آب و فاضلاب - شنبه بیست و نهم مهر ۱۳۹۱
بهره برداري و نگهداري از سيستم هاي جمع آوري فاضلاب - شنبه بیست و دوم مهر ۱۳۹۱
جدا کردن فنل و مشتقات آن - شنبه پانزدهم مهر ۱۳۹۱
جذب زیستی - شنبه هشتم مهر ۱۳۹۱
تصفیه ی بی هوازی - شنبه یکم مهر ۱۳۹۱
بیوراکتورهای غشایی - شنبه بیست و پنجم شهریور ۱۳۹۱
توليد آب كيفيت بالا از فاضلاب با نور خورشيد توسط محققان ايراني - سه شنبه بیست و یکم شهریور ۱۳۹۱
بررسی وضعیت سیل کشور : مشکلات و تنگناها - دوشنبه بیستم شهریور ۱۳۹۱
نکاتی در مورد آب آشامیدنی و تهیه آن در مکان های فاقط لوله کشی - یکشنبه نوزدهم شهریور ۱۳۹۱
کانتاکتورهای گردان بیولوژیکی (RBC) - چهارشنبه پانزدهم شهریور ۱۳۹۱
فیلترهای ریز - چهارشنبه هشتم شهریور ۱۳۹۱
اکتیو کردن لجن - چهارشنبه یکم شهریور ۱۳۹۱
بیوتکنولوژی در محیط زیست - یکشنبه بیست و نهم مرداد ۱۳۹۱
بررسی روشهای تصفیه فاضلاب شهری - یکشنبه پانزدهم مرداد ۱۳۹۱
مباني هيدروليكي شبكه جمع آوري فاضلاب - دوشنبه نهم مرداد ۱۳۹۱
احداث تصفیه‌خانه روستاهای بالادست سدها در اولویت است - یکشنبه یکم مرداد ۱۳۹۱
تصفیه‌خانه جدید آب قم - چهارشنبه بیست و هشتم تیر ۱۳۹۱
افتتاح مجهزترین تصفیه خانه فاضلاب غرب کشور در همدان - سه شنبه بیستم تیر ۱۳۹۱
BOD و آزمایش BOD - چهارشنبه چهاردهم تیر ۱۳۹۱
هفته صرفه جویی در مصرف آب - جمعه دوم تیر ۱۳۹۱
توضیح و نکات پارامترهای بیولوژیکی کیفیت آب - دوشنبه بیست و دوم خرداد ۱۳۹۱
توضیح و نکات پارامترهای شیمیایی کیفیت آب - پنجشنبه هجدهم خرداد

مرجع تخصصی آب و فاضلاب