مرجع تخصصی آب و فاضلاب

تمام سوالات شما در مورد میکروبیولوژی در پایان هم جنس کثیف سالمونلا شرح داده شده فصل اول- مقررات کار در آزمايشگاه ميکروب شناسيفصل دوم- وسايل و تجهيزات آزمايشگاه ميکروبيولوژي1 – نکاتي را که هنگام حضور در آزمايشگاه بايد رعايت کرد، نام ببريد؟(4مورد)الف) تمام افراد هنگام حضور در آزمايشگاه بايد از روپوش مخصوص و تميز استفاده کنند و در هنگام لزوم از وسايل محافظت کننده مانند دستکش ، عينک و پيش بند بهره بگيرند.2 – روپوش و البسه مشابه بايد هنگام خروج از آزمايشگاه تعويض گشته ، دقت شود که موقع غذا خوردن و استراحت، روپوش و پيش بند و ساير البسه محافظت کننده آزمايشگاه بر تن نباشد.3 – از قفسه هاي مناسب که در جوار آزمايشگاه تعبيه گرديده است براي نگهداري البسه استفاده شود.4 – لباسهاي مورد استفاده در آزمايشگاه بايد مرتباً شستشو و در صورت لزوم قبل از شستن سترون شود.2- آيا سيگارکشيدن در آزمايشگاه مجاز است ؟ چرا؟سيگار کشيدن در آزمايشگاه مجاز نيست، زيرا موجب ورود ميکروارگانيسمهاي بيماري زا به بدن مي شود.3 – براي دريافت نمونه هاي ارسالي به آزمايشگاه چه بايد کرد؟نمونه هايي که به آزمايشگاه ارسال مي گردد، حاوي تعداد و انواع نامشخصي از ميکروارگانيسمها مي باشند که بايد آنها را خطر بالقوه محسوب کرد، از اين رو براي دريافت نمونه، بهتر است محل جداگانه اي در نظر گرفته شود. اين محل مي تواند قسمتي از اتاق آزمايشگاه باشد که به قدر کافي روشن و ميز و وسايل مورد استفاده در آن از جنس قابل شستشو و تميز کردن است. وجود دستشويي در محل دريافت نمونه ضروري است. در صورتي که ظروف حاوي نمونه نشت مي کند، بايد پس از سترون کردن آنها را دور انداخت.4 – براي جلوگيري از انتشار هاگ قارچها در محيط آزمايشگاه، رعايت چه نکاتي لازم است؟ذرات حاصل از هاگ قارچها مي توانند از راه تنفس، کارکنان آزمايشگاه يا حيوانات آزمايشگاهي را آلوده نمايند و همچنين منبع خطرناک آلودگي ثانويه براي محيط هاي کشت و مواد مورد آزمايش باشند. در ظروف پتري حاوي کشت قارچ را با نوار چسب محکم ببنديد تا از انتشار هاگ قارچ جلوگيري به عمل آيد و در هنگام استفاده از سانتريفوژ و مخلوط کن نهايت دقت بايد مبذول گردد.5 – براي سترون کردن سوزن کشت چگونه عمل مي کنيد؟ چرا؟هنگام سترون کردن سوزن کشت در روي شعله بايد توجه داشت که امکان انتشار ميکروارگانيسمها در اثر حرارت شعله وجود دارد، از اين رو با حرکت دادن تدريجي سوزن از قسمت سر و شعله به قسمت گرم آن از اين پديده بايد جلوگيري کرد.6 – مقررات ايمني را در برخورد با حوادث ناگوار در آزمايشگاه شرح دهيد؟در موقوع وقوع هر حادثه اي در وهله اول بايد حفظ سلامتي فرد يا افراد مصدوم يا در معرض خطر ، نخستين هدف باشد. کمکهاي اوليه و اختصاصي پزشکي را بايد در نظر داشت و از حرکت دادن شخص مصدوم حتي الامکان جلوگيري کرد، مگر اينکه فرد مصدوم در معرض خطر ديگري مانند آتش گرفتگي يا خفگي به وسيله گازهاي سمي باشد، يا اينکه مطمئن باشيد که حرکت دادن صدمه بيشتري به فرد نمي زند.1 – ظروف مورد استفاده در آزمايشگاه را نام ببريد؟1 – پيپت2 – پتري ويش (پليت)3 – سرنگ فلزي4 – بطريهاي رقيق کننده2 – انواع پيپت را نام ببريد؟الف) پيپت شير: اين پيپتها فقط به منظور آزمايشهاي ميکروب شناسي و براي برداشت و انتقال 01/0 ميلي ليتر شير تنظيم و درجه بندي شده است.ب) پيپتهاي شيشه اي و پلاستيکي: اين پيپتها از مواد غيرسمي تهيه شده اند و داراي ديواره مستقيم، نوک گرد هستند و براي استفاده در آزمايشگاه ميکروب شناسي بکار مي روند.3- کاربرد پتري ويش چيست؟اين ظروف داراي حداقل 85 ميليمتر قطر داخلي و 12 ميليمتر عمق هستند. سطوح داخلي و خارجي اين ظروف بايد بدون ضايعه يا خراش و حباب باشد. ظروف پتري از شيشه و يا پلاستيک مناسب ساخته مي شوند و بايد داراي کف صاف باشد.4 – کاربرد بطريهاي رقيق کننده را توضيح دهيد؟بطريهايي از جنس بورو سيليکات با درپوشهي پيچ دار يا سر بطريهاي لاستيکي به گنجايش 150 ميلي ليتر مورد استفاده قرار مي گيرند. براي جلوگيري از تراوش مايع از درپوشهاي پيچ دار مي توان از واشرهاي مناسب و غيرقابل نفوذ استفاده کرد. بطريهاي تهيه رقت را در حجم 1(+/-)99 ميلي ليتر مي توان با مواد مناسب يا وسيله اي که پاک نشود علامت گذاري کرد. براي از بين بردن باقيمانده مواد و مايعات از دربهاي لاستيکي مخصوص بطري،لوله يا ساي ظروف، بايد ابتدا آنها را در آب معمولي با حرارت C ْ82 و يک ماده پاک کننده تميز کرد.5 – روشهاي سترون کردن را نام ببريد؟1- حرارت2 – صاف کردن3 – گاز دادن4 – تابش اشعه6 – استريل کردن را تعريف کنيد؟استريل کردن يعني عقيم کردن و بي حاصل نمودن و به منظور کشتن و از بين بردن کليه موجودات ذره بيني است.7 – روش حرارت دادن را توضيح دهيد؟براي وسايلي مانند پيپته و تشکهاي پتري سترون کردن با حرارت خشک انجام مي شود. همه وسايل را مي توان در هواي گرم دستگاه سترون کننده گذاشت و درجه حرارت را به مدت يک ساعت در 170 درجه سانتيگراد نگه داشت.براي موادي که به وسيله حرارت خشک يا حرارت مرطوب بالا خراب مي شوند سترون کردن متناوب به کار مي رود. براي بيشتر انواع محيطهاي کشت، لباسها، مواد پلاستيکي و ساير موادي که با حرارت خشک خراب مي شوند، روش سترون کردن به وسيله حرارت مرطوب و زير فشار بکار مي رود.8 – روش صاف کردن را توضيح دهيد؟خيلي از مواد در درجه حرارتي که معمولاً براي سترون کردن به کار مي رود، خراب مي شوند. براي سترون کردن اين مواد احساس به گرما که ممکن است مايع و يا به صورت محلول باشند مي توان از صاف کردن استفاده کرد. در اين روش صافيها به دو طريق باکتريها را مي گيرند . يکي به وسيله محل مکانيکي غربال مانند سوراخهاي کوچک صافي و ديگر با جذب ميکروبها توسط صافي به دليل تفاوت بارالکتريکي آنها.ادامه فصل دوم9 – مزايا و معايب استفاده از گاز اتيلن اکسايد براي سترون کردن چيست؟استعمال بخار اتيلن اکسايد تحت اثر فشار، در دستگاه مخصوص آن که شبيه اتوکلاو تغيير يافته است صورت مي گرد. اتيلن اکسايد براي عناصر ويروسي ، سلول باکتريها و قارچها و بيشتر اندوسپور باکتريهاي مقاوم به حرارت به شدت سمي است. به عنوان عامل سترون کننده، آن را به راحتي مي توان در دستگاه مخصوصش ، به کار برد و نسبتاً ارزان مي باشد. اتيلن اکسايد برخلاف بيشتر مواد شيميايي سمي روي موادي که سترون مي شوند به نسبت کمتري اثر خراب کننده و زيان آور دارد. باقيمانده آن را هم مي توان به راحتي با هوا دادن خارج کرد. اگر چه گاز اتيلن قابل اشتغال است ولي مخلوط 10% اتيلن اکسايد و 90% کربن دي اکسايد و يا اختلاط آن با فرئون نه تنها سترون کننده اي مؤثر است، بلکه غيرقابل اشتعال و غير قابل انفجار هم مي باشد. عيوب آن عبارت است از ، مدت طولاني کاربرد آن براي سترون کردن، واکنش آن با محتويات محيط هاي کشت و بعضي از مواد پلاستيکي، و باقيمانده اتيلن اکسايد که بعد از سترون کردن بايد آن را به وسيله هوادادن از محيط خارج کرد.10 – طرز سترون کردن با اشعه را شرح دهيد.تابش اشعه عبارت است از بکاربردن شعاع بونيزه کننده با انرژي زياد. اين اشعه ها عبارتند از پرتوهاي گاما که از منبع کبالت 60 يا سيزيوم 139 خارج شده، پرتوهاي کاتدي که از توليد کننده هاي الکترون و شتاب دهنده ها ساطع مي گردد.11- روش کار با انکلاوه را شرح دهيد؟1 – فلاسکهاي حاوي محيط کشت ميکروبي را در دستگاه سترون کننده قرار دهيد. 2 – در دستگاه را بسته، آن را قفل کنيد. 3 – شير دستگاه را باز کنيد تا بخاري که تشکيل مي شود جانشين هواي داخل دستگاه گردد. 4 – شير مربوط به قسمت بخار را ببنديد. اين کار باعث مي شود که بخار در داخل اتوکلاو جمع شده، فشار آن افزايش يافته و دما به حد مورد نظر برسد. 5 – با خاتمه سترون کردن، براي باز کردن اتوکلاو، کاري را که بايد انجام دهيد، عبارتست از بسته نگهداشتن شير خروج هوا تا هنگامي که فشار به صفر کاهش يافته، فشار سنج آن را نشان دهد. اگر موادي که سترون مي شوند حاوي مايعات نباشند مي توانيد براي کاهش دادن سريعتر فشار، شير خروج هوا را باز کنيد. اگر در اتاقک اتوکلاو مايعات وجود داشته باشند، چنين کاهش فشاري، باعث جوش آمدن آنها در ظروف خود شده، پنبه سر درب آنها را خيس کرده، آنها را به خارج پرتاب مي کند. از اين رو در مواقعي که مايعات سترون مي شوند، هميشه لازم است فشار را به تدريج کاهش داد. 6 – بعد از آن که فشار سنج نشان داد که ديگر هيچگونه فشار مربوط به بخار وجو ندارد مي توانيد در اتوکلاو را باز کرده، مواد و وسايل داخل آن را خارج کنيد. اگر مواد سترون کردن در اثر حرارت طولاني يا در اثر بخار آب امکان فاسد شدن دارند، آنها را بدون وقفه خنک کنيد.12 – نقش فشار در اتوکلاو براي سترون کردن چيست؟فشار به ميزاني که در اتوکلاو به کار مي رود، هيچ گونه اثري در سترون کردن ندارد. فشار فقط براي رساندن درجه حرارت بخار به بالاتر از 100 درجه سانتيگراد لازم است.13 – نقش زمان در اتوکلاو براي سترون کردن چيست؟زمان براي نفوذ بخار آب و گرم کردن مواد تا درجه حرارت سترون کردن ضروري است. حتي، هنگاميکه چنين درجه حرارتي حاصل شود، اسپورها وسلولهاي جوان همه يک باره کشته نمي شوند. ميزان مرگ و مير در يک درجه حرارت مشخص ثابت است و در مقابل يک عامل کشنده، در هر واحد زماني، نسبت ثابتي از يک تعداد معين ميکروبي کشته مي شوند.14 – نقش ماهيت بار اتوکلاو براي سترون کردن چيست؟معمولاً مواد حجيم و تقريباً غيرقابل نفوذ احتياج به زمان بيشتري براي سترون شدن دارند. بنابراين بهتر است، آنها را در واحدهاي کوچکتر سترون کرد. موادي که در برابر بخار قابليت نفوذ کم دارند و مواد خيلي حجيمي که نمي توان از راه تماس آنها را حرارت داد، احتياج به زمان طولاني تري دارند.15 – گرمخانه بايد داراي چه ويژگيهايي باشد؟ساختمان گرمخانه بايد صحيح باشد و مرتباً کنترل شود. دماي داخل گرمخانه نبايد از حد تنظيبم شده بيش از C ْ 1 تغيير نمايد. اختلافات دماي داخل گرمخانه را در زمانيکه ظرفيت آن پر شده است تعيين و مشخص کنيد. گرمخانه بايد به صورتي پر شود که فاصله بين رديف پتري ديشها و بين آنها و ديواره گرمخانه را 5/2 سانتي متر کمتر نباشد. ظروف قرار داده شده در گرمخانه بايد در مدت 2 ساعت به دماي مورد نظر برسند.16 – پرگنه نشانه چه هستند؟ وسيله شمارش تعداد پرگنه ها چه ناميده مي شود و از چه قسمتهايي تشکيل شده است؟در مرحله بعد از کشت و طي دوره رشد و تکثير، پرگنه ها(کلني ) هاي حاصل شده در محيط کشت نشان دهنده تقريبي ميزان آلودگي کلي در مقدار کشت داده شده از نمونه مي باشد و به اينصورت که هر يک پرگنه کوچک و يا بزرگ، نمايانگر حداثل يک ميکروارگانيسم فعال اوليه در نمونه به شمار مي آيد و تعداد کل ميکروارگانيسمها براساس تعداد پرگنه ها بر مبناي درجه دقت نمونه تعيين و محاسبه مي گردد. براي شمارش تعداد پرگنه ها در محيط کشت معمولاً از دستگاهي به نام کلني کانتر استفاده مي شود. اين دستگاه از چند قسمت مشخص تشکيل شده است. ذره بين، صفحه مدور تقسيم بندي شده به اشکال مربع شکل، نمراتور و لامپ برق براي انجام کار.17 – کار حمام آب در آزمايشگاه چيست؟در اندازه هاي مختلف و مناسب براي مقاصد آزمايشگاه طرح ريزي و از آنها براي نگهداري محيط هاي ذوب شده در C ْ 46 – 44 استفاده مي گردد. در مواقع عدم استفاده از حمام آب، در آن بايد بسته باشد. سطح آب داخل آن بايد به اندازه اي باشد که کاملاً سطح آگار موجود در ارلن يا ظروف ديگر را بپوشاند.18 – کار تکان دهنده مکانيکي در آزمايشگاه چيست؟تکان دهنده هاي مکانيکي براي يکنواخت کردن محتواي ظروف مناسب مي باشند و کار آنها شکستن مجموعه هاي ميکروبي در لوله وارلن است . براي اين منظور دستگاه بايد در جهت پائين و بالا حداقل به مدت 7 ثانيه کار کند.19- طرز کار با ميکروسکوپ را به طور خلاصه شرح دهيد؟يک ميکروسکوپ به طور عمده از عدسيهاي چشمي و عدسيهاي شئي با بزرگنماييهاي مختلف که حاصل ضرب درشتنمايي آنها تعيين کننده بزرگنمايي کل مي باشد تشکيل شده است. عدسي چشمي بر دو نوع مي باشند . عدسي چشمي معمولي براي استفاده بايد عدسيهاي شيئي اکروماتيک يا بدون رنگ و عدسيهاي هويژينان براي استفاده با عدسيهاي شيئي آپوکروماتيک يا رنگي مورد نظر مي باشند. لوله ثابت کننده عدسي چشمي، به طول معمول 60 ميليمتر است که در ميکروسکوپهاي دو چشمي از طريق يک قسمت متحرک قابل تنظيم به لوله هاي محل قرار گرفتن عدسيهاي شيئي مربوط مي گردد. در زير صفحه گردان عدسيهاي شيئي، صفحه مربع شکل با گيره مخصوص براي قراردادن لام (اسلايد) وجود دارد. براي بدست آوردن تصوير از لام روي صفحه ميکروسکوپ و تنظيم فاصله عدسيهاي شيئي با اسلايد، پيچهاي تنظيم بزرگ و کوچک ويژه اي در روي باز و (بدنه) ميکروسکوپ تعبيه شده اند که با استفاده از آنها مي توان فاصله را حد کم و يا زياد تغيير داد. در زير صفحه هاي لام به ترتيب کندانسور، ديافراگم ، ائينه و لامپ ميکروسکوپ قرار دارد. نور متصاعد شده از منبع نور و آئينه پس از گذشتن از ديافراگم و کندانسور به شيئي مورد نظر در لام و سپس عدسيهاي شيئي و چشمي انعکاس مي يابد.20 – چگونگي تنظيم عدسيهاي شيئي با لام را توضيح دهيد؟براي کسب تصوير از لام عدسيهاي شيئي بايد هر کدام در فاصله معيني قرار داشته باشند. ميزان فاصله عدسي شيئي (2/3 X) با لام برابر 23 ميليمتر، عدسي شيئي (10 X) با لام معادل 5 ميلمتر، عدسي شيئي (40X) با لام برابر 2/1 – 1 ميلمتر و عدسي شيئي (100x) برابر 9/0 ميليمتر مي باشد.فصل سوم «نمونه برداري»1 – ارزش نمونه برداري صحيح را بيان کنيد.نمونه برداري صحيح اساس کار بررسيهاي ميکروبيولوژيکي است که متعاقب همه گيري مسموميتهاي غذايي انجام مي گيرند و يا براي بازرسي و نظارت مواد غذايي ضرورت دارند. تصميم در انتخاب نمونه، تعداد نمونه هايي که مي بايد انتخاب شوند، روش نمونه برداري و چگونگي راههاي حمل آنها بطوريکه تغيير فاحشي در تعداد و کيفيت ايجاد نشود حايز اهميت است2 – نمونه و نمونه اوليه را تعريف کنيد؟نمونه: يک نمونه بايد داراي تمام ويژگيهاي ماده اي باشد که از آن برداشته مي شود. نمونه اوليه عبارتست از ماده جمع آوري شده در نمونه برداري، که حداقل بايد دو برابر مقدار ماده غذايي لازم براي آزمايش باشد. مقدار مازاد آن براي مواقعي که نياز مجدد به نمونه است نگهداري شود.3 – ويژگي وسايل نمونه برداري را توضيح دهيد؟ظروف نمونه برداري بايد خشک، تميز و سترون باشند. براي اين منظور مي توان از ظروف شيشه اي دهان گشاد و در پيچ دار همچنين از ظروف فلزي زنگ نزن و کيسه هاي پلاستيکي يکبار مصرف محکم با گنجايش کافي، به طوريکه بتوان 250 گرم نمونه را در آن جاي داد، استفاده کرد. ساير وسايل نمونه برداري عبارتند از چنگال، قاشق ، انبرک، گيره، کاردک، مته هاي مخصوص، سيني، پيپت، درباز کن، قيچي و ... چراغ الکلي ، چراغ گاز کوچک.4 – چگونگي نمونه برداري از آب را شرح دهيد؟براي اين منظور از شيشه هاي 100 ميلي ليتر در سمباده اي يا فلزي استفاده مي شود. شيشه ها را پس از سترون نمودن در کاغذ پيچيده، در موقع برداشت نمونه کاغذ را از سرشيشه باز مي کنند و با دست چپ شيشه را نگاهداشته، با انگشت کوچک و کف دست راست در شيشه را بر مي دارند. پس از آنکه دهانه شيشه را چند لحظه روي شعله نگاه داشتند آن را از آب پرکرده، سپس در شرايط کاملاً سترون در آن مي بندند. اگر برداشت آب از شير صورت مي گيرد بايد دور دهانه شير را چند لحظه شعله داده، پس از آن شير را باز کنند تا آب از شير براي چند لحظه جاري شود سپس نمونه برداري را انجام دهند.5 – روش نمونه برداري غذاهاي منجمد را توضيح دهيد؟اين غذاها بايد در تمام مدت حمل و نقل تا زمان رسيدن به آزمايشگاه همچنان به حالت انجماد باشند. مانند مرغ، فرآورده هاي تخم مرغ و غذاهاي دريايي پخته شده، چنين فرآوردهايي اگر از حالت انجماد خارج شده باشند نبايد مجدداً منجمد گردند.6 – روش نمونه برداري از گوشت طيور را شرح دهيد.براي اين منظور بايد از کيسه هاي پلاستيکي جداگانه براي قسمتهاي مختلف لاشه استفاده شود. به محض رسيدن اين نمونه به آزمايشگاه بايد آن را از کيسه خارجي درآورده، در يک سيني قرار داده، در يخچال بگذارند تا کمي باز و نرم شود سپس لفاف يا بقاياي لفاف را از آن جدا کنند.7 – به هنگام خرد کردن نمونه غذايي جامد رعايت چه نکات الزامي است؟مدت عمل خرد کردن نبايد طولاني شود، زيرا باعث بالا رفتن حرارت و در نتيجه از بين رفتن بعضي از باکتريها خواهد شد، همچنين سرعت بيش از حد مخلوط کن ممکن است باعث آسي مکانيکي و در نتيجه از بين رفتن باکتريها گردد و در شمارش تعداد باکتريها باعث اشتباه شود، کم بودن زمان مخلوط کردن باعث مي شود که تمامي ميکروبهاي موجود در ماده غذايي د رمحيط آزاد نشده، در نتيجه سوسپانسيون ناهمگني ايجاد گردد.8 – روش رقيق کردن نمونه هاي مختلف را توضيح دهيد؟در بسياري از موارد ميزان آلودگي در نمونه مورد نظر در حد بالايي قرار دارد لازم است قبل از کشت دادن نمونه در محيط کشت آن را با محلولهاي استريل به نسبت معين رقيق نمود تا بتوان براحتي و با دقت بيشتر آلودگي موجود در نمونه را تعيين کرد. اين عمل به خاطر اين است که معمولاً بر طبق استاندارد بين المللي بعد از کشب نمونه ها در محيط کشت و قراردادن گرفتن محيط ها به مدت 18 تا 24 ساعت در اينکوباتور با حرارت معين ، تعداد پرگنه هاي ناشي از تغذيه، رشد و تکثير ميکروارگانيمسهاي موجود در نمونه مي بايد در حد 30 تا 300 قرار داشته باشد.9 – محلولهاي رقيق کننده را نام ببريد؟ خواص ديگر آنها را بنويسيد؟آب مقطر استريل، سرم فيزيولوژي، محلول سيلين در محلول رينگر، خواص ديگر آنها عبارت است از :1 –جدا کردن ميکروارگانيسمهاي موجود در نمونه از آن و هدايت آنها به داخل محلول استريل2- جدا و پراکنده نمودن ميکروارگانيسمها از يکديگر و در محلول استريل10 – چرا نمونه برداري از شيرخشک بايد خيلي سريع انجام گيرد؟چون شيرخشک خيلي سريع رطوبت را جذب مي کند، نمونه برداري از ظروف بايد خيلي سريع انجام شده، بلافاصله نمونه برداشتي به ظروف سترون و شيشه اي منتقل شود و مهر و موم گردد.11- چرا براي حمل و نقل و نگهداري نمونه ها از وسايلي مانند يخدان، يخچال يا فريزر را استفاده مي شود؟در حمل و نقل نمونه ها بايد کوشش شود که شرايط ميکروبيولوژيکي ماده غذايي تغيير نکند. از اين رو بايد حتي الامکان به فوريت نمونه ها را پس از برداشتن مورد آزمايش قرار داد و يا اينکه از وسايلي مانند يخدان، يخچال و فريزر استفاده شود که امکان تغيير شرايط ماده غذايي در طول حمل و نقل و نگهداري وجود نداشته باشد.فصل چهارم محيط هاي کشت باکتريها1 – محيط کشت را تعريف کنيد و انواع آن را نام ببريد؟براي هر يک از ميکروارگانيسم ها بايد مخلوطي متعادل از غذاهاي مورد نياز ، به غلظتي تهيه گردد که رشد موجود در آن بخوبي صورت گيرد.چنين مخلوطي را محيط کشت گويند.1 – محيط هاي کشت ساده2 – محيط هاي کشت پيچيده3 – محيط هاي تشخيصي يا متمايز کننده2 – محيط کشت ساده را تعريف کنيد؟اين محيط به نحوي گزينش مي شوند که بتوانند مواد مغذي لازم براي رشد و نمو تمام ميکروارگانيسمهاي آلوده کننده را فراهم سازند. مهمترين نمونه هاي اين نوع محيط کشت Nutnient agar جامد و Nutrient broth مايع است که بيشتر براي شمارش تعداد ميکروارگانيسمهاي آلوده کننده مواد غذايي بکار مي روند.3 – محيط کشت پيچيده را تعريف کنيد؟حاوي موادي هستند که براي رشد ميکروبها ضروري است. ولي تمام محتويات اين محيط ها، همينطور مقدار آنها مشخص نيست. خيلي از محتويات محيط هاي کشت پيچيده عبارتند از :نتيجه هضم و تجزيه بافتهاي گياهي، گوشتها، کازئين و سلول مخمرها.4 – محيط هاي تشخيصي يا متمايز کننده را تعريف کنيد؟با مواد شيميايي نسبتاً خالص و با غلظت کاملاً مشخص به ميزاني که براي رشد ميکروبها ضروري است تهيه مي کنند. اين محيط ها بر حسب نيازهاي غذايي ميکروارگانيسمهاي مختلف با يکديگر اختلاف دارند.5 – PH را تعريف کنيد؟PH يک محاسبه لگاريتمي مي باشد که با فرمول PH=log1/(H+)= -bg مشخص مي شود. بنابراين 7= PH نمايشگر تراکم يونهاي هيدروژن (H+) به مقدار مي باشد.6 – PH بالاي 7 نشانگر چيست؟هر PH که بالاتر از 7 باشد نشان مي دهد که محلول بيشتر از آب خالص قليايي است (داراي تراکم يون هيدروژن کمتري است)7 – PH کمتر از 7 نشانگر چيست؟هر PH اي که کمتر از 7 باشد نشاندهنده محلولي است که بيشتر از آب خالص اسيدي است.8 – انواع روشهاي اندازه گيري PH را نام ببريد و هرکدام را تعريف کنيد؟1 – روشهاي پتانسيومتري: تعيين PH، از اختلاف پتانسيل بين محلول آزمايشي و يک محلول استاندارد براي اندازه گيري PH استفاده مي شود. در بيشتر PH مترها از يک الکترود شيشه اي نيم سلول که داراي پتانسيل معين است ، همينطور از يک الکترود شاهد نيم سلول که داراي يک مايع (اغلب کلروپتاسيم اشباع شده مي باشد) استفاده مي کنند. اختلاف پتانسيل بين دو انتهاي نيم سلولها بر حسب ولت اندازه گيري و بعد در روي درجه بندي دستگاه به PH تبديل مي شود.2- روشهاي کلريمتري: در اين روشها براي تعيين PH از معرفهاي مختلف که به شکل محلول يا کاغذ PH مي باشند استفاده مي شود و اين محلولها يا کاغذ بر حسب PH هاي مختلف رنگهاي مختلفي توليد مي کنند. اين معرفها ترکيباتي هستند که در محلول به صورت سيستمهاي دهنده و گيرنده پروتون عمل کرده ، هر کدام داراي رنگهاي متفاوتي هستند.9 – معمولترين محيط کشت ميکروارگانيسمها چيست و از چه موادي ساخته مي شود؟معمولترين محيط کشت ميکروارگانيسمها محيط غذايي است که حاوي عصاره گوشت و پيتون مي باشد. براي تهيه عصاره گوشت، گوشت بدون چربي گاو را در آب بجوشانيد و بعد با تبخير آن را به صورت چسب درآوريد. مواد تشکيل دهنده عصاره گوشت از محصولات مختلفي تشکيل يافته که در اثر تجزيه پروتئينها حاصل مي شود.10 – آگار چيست؟ خواص آن را شرح دهيد؟هنگاميکه بخواهيم باکتريها را روي يک محيط کشت جامد رشد دهيم معمولاً از يک واسطه جامد کننده به نام آگار در محيط کشت استفاده مي شود. آگار يک پلي ساکاريد پيچيده است که از يک جلبک دريايي گرفته شده است و به عنوان يک قوام دهنده ژله ، بستني و ... مدتهاي طولاني مورد استفاده بوده است، با خواص مهمي که دارد براي ميکروبيولوژي باارزش است. تعداد کمي از باکتريها مي توانند آگار را تجزيه و فاسد کنند بنابراين آگار جامد باقي مي ماند.11- طرز تهيه و آماده سازي محيط هاي کشت پودري موجود در بازار را بنويسيد؟در مواردي که محيط کشت مورد نظر به صورت پودر است به اندازه مناسب از آن وزن نموده، در داخل ارلن بريزيد و بعد از افزودن آب مقطر به اندازه تعيين شده و حل کردن محيط کشت و قرار دادن در پيچ و يا در پوش پنبه اي و بستن دهانه آن با کاغذ آلومينيومي، ارلن را داخل ارتوکلاو قرار دهيد و در حرات 121 درجه سلسيوس و فشار 15 پوند بر اينچ آن را براي مدت 15 دقيقه استريل نمائيد. در مرحله بعدي پتري ويش و ظرف کشتهاي استريل شده 15 پوند بر اينچ آن را براي مدت 15 دقيقه استريل نمائيد. در مرحله بعدي پتري ويش و ظرف کشتهاي استريل شده را که مورد نياز هستند از آون خارج نموده، داخل لوله فلزي پوششي يا کاغذ آلومينيومي باقي بگذاريد تا سرد شوند. ميز کار را با پارچه تميز نموده، با پنبه الکلي آلودگي سطح آن را پاک نمائيد. بعد از چيدن پتري ويشها بر روي فيبر و نوشتن نام محيط کشت بر روي درب آنها با بلند کردن دربشان در هر کدام به اندازه اي که تمام سطح پتري ويش را بپوشاند از محلول محيط کشت ريخته، سپس درب آنها را براي مدتي به حالت زاويه دار روي لبه آنها قرار دهيد. بعد از افزودن مواد محيط کشت به تمام پتري ويشها، درب آنها را به حالت اول بازگردانيد تا از ورود ميکروبها به داخل پتري ديشها جلوگيري شود. پس از سرد شدن و بسته شدن محلول محيط کشت، آنها را داخل يخچال قرار دهيد تا بعداً مورد استفاده قرار گيرند.فصل پنجم «روشهاي کشت ميکروارگانيسمها»1- روشهاي کشت ميکروارگانيسمها را نام ببريد؟1 – کشت ميکروارگانيسمهاي هوازي2 – کشت بي هوازي باکتريها3 – کشت بي هوازي باکتريها با استفاده از ديسکاتور4 – روش شمارش مستقيم2 – روش کشت پورپليت را براي شمارش ميکروارگانيسمها توضيح دهيد؟در روش پورپليت با توجه به رقتهاي مختلف تهيه شده از نمونه غذايي براي هر رقت 2 تا 4 ظرف پتري اختصاص داده مي شود و يک ظرف نيز به عنوان کنترل براي اطمينان از سترون بودن روف پتري و محيط کشت در نظر گرفته مي شود. روي ظروف پتري را با شماره نمونه، رقت و تاريخ آزمايش مشخص کرده، در هر دو يا چهار ظرف پتري از رقت مربوط ، يک ميلي ليتر قرار مي دهند به اين ترتيب با استفاده از يک پيپت، کليه رقتها به ظروف پتري منتقل مي شوند، محيط کشت مناسب قبلاً ذوب و در حمام مادي 45 درجه سانتيگراد نگهداري مي شود پس از ريختن رقتهاي مختلف ماده غذايي به داخل ظروف پتري به هر ظرف حدود 15 ميلي ليتر از محيط کشت مذاب که حرارت آن بيشتر از 45 درجه نباشد اضافه مي شود . پس از آن بلافاصله در ظرف را بسته، آن را 15 بار از عقب به جلو، 5 بار در جهت عقربه هاي ساعت، 5 بار از چپ به راست و 5 بار خلاف عقربه هاي ساعت به آرامي حرکت مي دهند تا نمونه و محيط کشت بخوبي مخلوط شوند.کمي صبر کنيد تا محيط کاملاً ببندد و بعد، از ميحط مذاب که همچنان در حمام بن ماري نگهداري شده مقدار کمي روي هر ظرف پتري مي ريزند به طوري که لايه نازکي از محيط سطح ظرف پتري را بپوشاند. در نتيجه اين عمل از آلوده شدن سطحي جلوگيري مي شود و همچنين تا اندازه اي شرايط بي هوازي براي نشان دادن حالات تخميري برخي از باکتريها ايجاد مي گردد. پس از بسته شدن لايه دوم ظروف پتري را به طور واژگون در گرمخانه با توجه به حرارت مناسب رشد باکتري مربوط قرار مي دهند. کشتها را مدت 24 ساعت در گرمخانه نگهداري مي کنند و پس از اين مدت به کمک دستگاه پرگنه شمار، پرگنه هاي ظاهر شده در ظروف پتري را که بين 300 – 30 پرگنه دارند مي شمارند. مجدداً 24 ساعت ديگر ظروف را در گرمخانه قرار داده، پس از اين مدت يک بار ديگر نيز تعداد پرگنه ها را مي شمارند. ميانگين تعداد پرگنه هاي شمارش شده در دو يا چهارظرف پتري با در نظر گرفتن رقت آن تعداد ميکروارگانيسمهاي موجود در ماده غذايي را تعيين مي کند.3- روش کشت سطحي را براي شمارش ميکروارگانيسمها توضيح دهيد؟در اين روش بايد ظروف پتري حاوي محيط کشت قبلاً تهيه شده باشند و سطح محيط با قراردادن آنها در گرمخاه 55 -50 درجه سلسيوس به مدت نيم تا دو ساعت خشم شود. در اين مدت بايد در ظرف پتري باز و سطح محيط رو به پائين باشد. سپس با توجه به رقتهاي تهيه شده، براي هر رقت 2 تا 4 ظرف پتري انتخاب نمود و يک ظرف به عنوان کنترل منفي در نظر گرفت . روي هر ظرف پتري را با شماره نمونه رقت و تاريخ کشت مشخص مي کنند و پس از تهيه رقتها، از رقيق ترين آنها به کمک پيپت 1/0 ميلي ليتري برداشت کرده، در سطح محيط مي ريزند و بعد همان پيپت را رقت بعدي که 10 برابر بيشتر است سه بار شسته و 1/0 از آن را برداشته در ظرف پتري مربوط مي ريزند. به همين ترتيب ادامه داده مي شود تا آخرين رقت، سپس براي هر رقت از يک پخش کننده شيشه اي سترون استفاده کرده، نمونه را بخوبي در سطح ظرف پتري مي گسترانند. نحوه حرکت ميله شيشه اي يا آنس پلاتين روي سطح محيط کشت بايد به گونه اي باشد که از زخمي کردن سطح محيط کشت جلوگيري کند. انجام اي کار با استفاده از ميله شيشه اي سترون آسانتر مي باشد.سپس ظروف پتري را مانند روش قبل با توجه به انتخاب درجه حرارت و زمان گرمخانه گذاري، مدت 24 ساعت در گرمخانه 1 35 درجه سلسيوس قرار داده، پس از 24 ساعت ظروفي را که بين 300- 30 پرگنه دارند مي شمارند. مجدداً ظروف را براي 24 ساعت ديگر گرمخانه گذاري کرده، پس از آن پرگنه ها را شمارش مي کنند و ميانگين شمارش را بدست مي آورند.4 – روش شمارش باکتريها با کاغذ صافي چه مزايايي دارد و بيشتر در چه مواردي به کار مي رود؟کاغذهاي صافي مخصوص ميکروب شناسي در صنعت ساخته شده است که به دليل داشتن منافذ بسيار ريز، ميکروبها را در خود نگه مي دارند. از اين کاغذ صافيها براي ستون کردن مايعات و محلولهاي مختلف حساس به حرارت استفاده مي شود. بعضي از کارخانه هاي سازنده وسايل آزمايشگاهي از اين نوع کاغذها با قيفهاي مخصوص که در برابر حرارت مقاوم اند و قابل سترون شدن مي باشند براي شمارش و جستجوي باکتريها در آب و فرآورده هاي دارويي ساخته اند و حتي بعضي از سازندگان ظروف پتري مخصوص که قطر آنها متناسب با کاغذهاي صافي است و محيط هاي کشت آماده در آمپولهاي کوچک براي يکبار کشت و حتي گرمخانه هاي کوچک که با برق اتومبيل و يا با باتري کار مي کنند براي عمليات صحرايي تهيه و عرضه کرده اند. از اين صافيها براي جستجو و شمارش ميکروبها در آب آشاميدني و ديگر آشاميدنيهايي که تعداد باکتريهاي آنها کم است و لازم مي باشد که حجم زيادي از نمونه براي شمارش و جستجوي باکتري بکار رود استفاده مي شود.از اين روش در بهداشت محيط و کنترل آب و فاضلاب و بررسيهاي همه گيري شناسي بسيار ارزشمند است.5 – روش شمارش مستقيم را شرح دهيد؟در روش شمارش مستقيم مي توان از لامهاي مخصوص نئوبار و يا لام توما که معمولاً براي شمارش گلبولهاي خون بکار مي رود استفاده نمود. بدين ترتيب که نمونه مورد آزمايش به نسبتهاي معين با آب مقطر و يا سرم فيزيولوژي و يا هر رقيق کننده مناسب ديگر، رقيق مي شود. بعد از رقت تهيه شده روي لام توما ريخته، يک لامل سنگين روي آ ن قرار مي دهند. چند دقيقه صبر کرده، سپس در زير ميکروسکوپ با عدسي 40 ميکروارگانيسمها را در حجم معيني شمارش مي کنند و با توجه به رقت نمونه – تعداد ميکروارگانيسمها در هر گرم و يا سانتيمتر مکعب بدست مي آيد.فصل ششم رنگ آميزي ميکروارگانيسمها1 – مزاياي رنگ آميزي را نام ببريد؟1 – ايجاد تضاد بين ميکروارگانيسمها و زمينه آنها، که در نتيجه باعث تمايز اشکال مختلف مي شود.2 – امکان بررسي ساختمانهاي داخلي سلول باکتريها، مثل ديواره سلولي، واکوئل، يا ضمائم هسته را فراهم مي نمايد.3 – به باکتري شناس امکان مي دهد که در درشت نمايي بيشتر استفاده کند.2 – ماده رنگي را تعريف کنيد؟مواد رنگي اغلب املاحي هستند که يکي از يونهاي آنها رنگي است يک ملح يا نمک ترکيبي است که از يک يون با بارالکتريکي مثبت و يک يون با بار الکتريکي منفي تشکيل شده است. ماده رنگي ساده متيلن بلو در حقيقت ملح کلرو متين بلو مي باشد که تجزيه آن کلرورمتيلن بلو -----> متين بلو + کلرور3 – روشهاي رنگ آميزي را نام ببريد؟الف ) رنگ آميزيهاي ساده :1 – مواد رنگي قليايي2 – مواد رنگي اسيدي3 – مواد رنگي خنثيب) رنگ آميزيهاي تشخيصي :1 - رنگ آميزي گرم2- رنگ آميزي اسيد فست4 – طرح رنگ آميزي با رنگهاي قليايي را توضيح دهيد؟براي رنگ آميزي رنگهاي قليايي متيلن بلو، کريستال و يوله و کربول فوشين را به بکار خواهيد برد، تمام اينها رنگهاي قليايي هستند. ولي از نظر ميزان و درجه رنگ کردن سلول با يکديگر متفاوتند. متيلين بلو با بار الکتريکي منفي بکندي وارد واکنش شده، براي رنگ کردن مناسب يک نمونه ميکروبي در حدود 30 تا 60 ثانيه وقت لازم دارد. کريستال ويوله داراي قدرت واکنش بيشتر است و به طور معمول براي رنگ کردن احتياج به حدود 10 ثانيه وقت دارد.5 – اساس رنگ آميزيهاي تشخيصي چيست؟اساس رنگ آميزيهاي ساده بر اين حقيقت بنا شده است که سلول باکتريها از نظر شيميايي از محيط اطرافشان متفاوت است و بنابراين مي توانند پس از رنگ آميزي از محيط خود متمايز شوند. خود ميکروارگانيسمها هم داراي اختلافات شيميايي و فيزيکي هستند و بدين طريق در مقابل يک روش رنگ آميزي معين واکنشهاي متفاوتي نشان مي دهند. اين اصلي است که براساس آن رنگ آميزيهاي تشخيصي بنا شده است. رنگ آميزي تشخيصي از اين تفاوت در ميزان بي رنگ شدن استفاده کرد، انواع مختلف باکتريها را از يکديگر متمايز مي کنيم.6- به طور خلاصه رنگ آميزي گرم را توضيح دهيد؟با به کار بردن اين روش مي توان باکتريها را به دو گروه تقسيم کرد: گرم مثبت و گرم منفي.در رنگ آميزي گرم چهار محلول مختلف مورد نياز است. يک رنگ قليايي، يک دندانه يک عامل رنگ بر و يک رنگ دوم.دندانه ماده اي است که گرايش يا جذب ماده رنگي را به سلول افزايش مي دهد ، يعني به شکلي تثبيت رنگ را در روي سلول تسهيل مي کند. اسيدها، قليائيها، املاح معدني و يد را مي توان به عنوان دندانه مثال زد. سلولي که زير تأثير دندانه است بيشتر و بهتر رنگ مي شود عامل رنگ بر ، همانطور که از اسمش معلوم است، ماده اي است که رنگ را از يک سلول رنگ شده خارج مي کند. بعضي از سلولهاي رنگ شده راحتتر از سلولهاي ديگر بي رنگ مي شوند. در رنگ آميزي گرم و در ساير روشهاي رنگ آميزي تشخيصي از اين تفاوت در ميزان بي رنگ شدن استفاده کرد، انواع مختلف باکتريها را از يکديگر متمايز مي کنيم.7 – رنگ آميزي اسيد فست را توضيح دهيد؟رنگ آميزي اسيدفست، رنگ آميزي تشخيصي است که ميزان و درجه مقاومت سلولهاي رنگ شده را در برابر رنگ بري اسيدها تعيين مي کند. خاصيت مقاومت در برابر اسيدها در بعضي مايکوباکتريومها و اکتيو ميستها بستگي به مقدار زيادي ليپيد دارد که در آنها موجود است. براي رنگ آميزي اين باکتريها حرارت و رنگي که داراي گرايش قوي به سلول اي باکتريها دارد مورد نياز است.اين باکتريها، بعد از يک بار رنگ شدن ، به دشواري ممکن است بي رنگ شوند.در اين روش از کربول فوشين گرم براي رنگ آميزي، و از محلول اسيد – الکل به عنوان عامل بي رنگ کننده استفاده و بعد هم رنگ آميزي دوم سلول باکتريها عملي مي شود. باکتريهاي اسيد فست ، کندتر از ساير ميکروارگانيسم ها، در برابر اسيد – الکل بي رنگ شده ، بعد از رنگ آميزي دوم ، رنگ اوليه خود را حفظ مي کنند.8 – کپسول در باکتريها چيست و روش رنگ آميزي آن را بنويسيد؟خيلي از باکتريها به وسيله يک لايه صمغي با ضخامتهاي مختلف احاطه شده اند که به نام کپسول خوانده شده، نسبت به سلول با شدت کمتري رنگ آميزي مي شوند چون اغلب اوقات کپسول ها به صورت يک محوطه رنگ نشده در اطراف سلولهاي رنگ شده ظاهر مي شوند. بنابراين مي توانند با مواد خارجي رنگ نشده مثل محوطه خالي حاصل از مچاله و منقبض شدن سلولها، اشتباه شوند، براي نشان دادن کپسولها مهمترين روش رنگ آميزي روش رنگ آميزي منفي است.9 – ولوتين چيست چگونه رنگ آميزي مي شوند؟1- گستره اي از باسيلوس سرئوس تهيه کنيد. بگذاريد تا خشک شده، آن را با حرارت تثبيت کنيد.2 – يک قطره محلول آبي اسيدي شده متيلن بلو اضافه کنيد.3 – روي نمونه حاصل يک لامل گذاشته، آن را با عدسي شيئي روغني ايمرسيون مشاهده کنيد.بيشتر محتويات سلولي، مثل پروتئينها، با رنگهاي قليايي فقط هنگامي رنگ مي شوند که PH محيط اطرافشان بالاتر از نقطه ايزوالکتريک آنها باشد. مواد که داراي نقطه ايزوالکتريک خيلي اسيدي هستند با يک رنگ قليايي اسيدي شده رنگ آميزي مي شوند و لوتين که از مواد اسيدي تشکيل شده با يک رنگ قليايي حتي در کمتر از PH 4 هم رنگ مي شود.فصل هفتم «سنجش ميزان رشد ميکروارگانيسمها»1 – روشهاي مختلف تعيين تعداد باکتريها را توضيح دهيد؟براي شمارش کلينها مي توان از صافيهاي غشايي استفاده کرد. با عبور دادن يک نمونه از درون صافي غشايي گيرنده باکتريها، مي توانيد سلولها را در سطح صافي بدست آوريد. سپس با بکار بردن يک محيط کشت مناسب، سلولها روي سطح صافي رشد کرده تعداد کلينهاي حاصل نشان دهنده تعداد باکتريهاست.شمارش مستقيم ميکروسکوپي، که در آن حجمي معين از يک نمونه را روي يک سطح معين لام پخش مي کنند، با شمارش ميکروبها در يک سطح مشخص و ضرب آن در ضريب مخصوص، مي توانيد تعداد ميکروبهاي نمونه اصلي را محاسبه کنيد. براي راحت کردن عمليات، لامهاي مخصوصي براي شمارش وجود دارد که داراي يک گودي با عمق و حجم مشخص است و به مربعهايي تقسيم شده است. تعداد ميکروبها در يک حوزه معين شمارش شده، با در نظر گرفتن اين که نسبت حجم کلي به حجم محاسبه شده معين است مي توان تعداد کل باکتريها را در نمونه محاسبه کرد.2 – روشهاي تعيين توده هاي سلولي را بيان کنيد؟1) انتشار نور يا روشهاي کدورت سنجي2) اندازه گيري شيميايي محتويات سلولي3) روشهاي وزن خشک4) روشهاي حجم سلولي3 – براي تعيين باکتريهاي مدفوع در آب از چه روشي استفاده مي شود؟صافيهاي غشائي در تعيين باکتريهاي مدفوع در آب مورد استفاده قرار مي گيرد. در اين روشهاي کشت سلولهاي زنده اي که در محيط هاي آماده شده تکثير مي يابند اندازه گيري مي شوند.4 – در روش بريد چگونه مي توان تعداد باکتريها را تعيين کرد؟حجم معيني از نمونه را در يک سطح سانتي متري لام پخش کرده، آن را خشک و تثبيت و رنگ مي کنند. بعد تعداد ميکروارگانيسمها را در حوزه هاي متعدد ميکروسکوپي تعيين مي کنند. از آنجايي که ساخت حوزه ميکروسکوپي مشخص است، شمارش باکتريها را مي توان محاسبه کرد.5 – روش کمي کشت روي تشک را به طور خلاصه بيان کنيد؟براي شمارش باکتريها نمونه را رقيق کرده، روي تشک کشت مي دهند، و بعد از قرار دادن در گرمخانه ، کلينهاي ايجاد شده را مي شمارند. پس از آن، تعداد باکتريهاي نمونه اصلي را با ضرب کردن تعداد کلينهاي تشکيل شده در درجه رقت (ضريب رقت) تشک مخصوصي که شماره شده است تعيين مي کنند. رقت را اغلب اوقات با علامت منفي نشان مي دهند. براي رقيق کردن کمي يک نمونه اغلب يک گرم يا يکي ميلي گرم نمونه با يک سري لوله آزمايش يا بطريهايي که حاوي مقدار معيني آب استريل يا محلول تامپون است بتدريج رقيق مي شود. در اين آزمايش يک ميلي ليتر از نمونه آب را به 99 ميلي ليتر آب استريل اضافه کرده، در نتيجه داراي رقت يک صدم از نمونه اصلي خواهيد شد. با ادامه تدريجي اين عمل مي توانيد نمونه هايي با رقت و و غيره بدست آوريد. سپس با کشت دادن يک ميلي ليتر و 1/0 ميلي ليتر از هر کدام از رقتها مي توانيد تشکلهايي با رقت و بيشتر بدست آوريد.6 – کار شمارش گر کبک را توضيح دهيد؟تشکهاي شمارش، کلينهاي تشکيل شده در تشکهاي ژلوزه را مي توان در دستگاههايي مثل شمارشگر کلني کبک که در آن يک منبع نوراني غيرمستقيم و يک ذره بين تعبيه شده است، شمرد. تشک را به طور وارونه روي شمارشگر قرار دهيد. براي ممانعت از دوباره شمردن کلينها، هر کلني شمرده شده را با يک مواد چرب يا قلم در روي تشک علامتگذاري کنيد. اگر تشکهاي زيادي را بايد شماره کرد. ماشين حساب مي تواند مفيد باشد.7 – روش محاسبه شمارش تشکها را با ذکر مثال توضيح دهيد؟تعداد باکتريها در ميلي ليتر نمونه اصلي (که شمارش تشک مي باشد) به وسيله ضرب کردن تعداد کلينها در درجه رقت بدست مي آيد براي مثال اگر در تشک با رقت تعداد 150 کلني شمرديد، مي توانيد چنين محاسبه کنيد:150000=10000 ×150 يعني در هر ميلي ليتر نمونه اصلي 150000 باکتري وجود دارد.8 – عوامل محيطي به چند دسته تقسيم مي شوند؟عوامل محيطي به سه دسته کلي تقسيم مي شوند:1 – فيزيکي (اثرات حرارت يا فشار قوي)2 – شيمايي (احتياج به غذاها و عکس العمل در برابر سموم)3 – بيولوژيکي در اساس شيميايي مثل اثرات متقابل انواع مختلف موجوداتي که با همديگر زندگي مي کنند.9 – عوامل مؤثر بر نوع تخمير مواد غذايي را بنويسيد؟نوع تخميري که در يک غذا صورت مي گيرد در درجه اول، با محتواي کربوهيرات و PH آن معين مي شود، وجود کربوهيراتها، اسيديته بالا و ضعيف بودن غذاهاي تامپونه باعث مي شوند که عمل تخمير الکلي به وسيله مخمرها صورت گيرد، در حاليکه وجود کربوهيدراتها، اسيديته پائين و وجود غذاهاي تامپونه قوي باعث مي شود که تخمير اسيد لاکتيکي انجام شود.10 – باترميلک کشت شده را تعريف کنيد؟عبارت است از شير بدون چربي و يا کم چربي پاستوريزه که بوسيله باکتريهاي اسيد لاکتيکي تخمير شده، در نتيجه در آن اسيد لاکتيک و مواد فرار توليد مي شود. اين عمل باعث انعقاد شير مي شود و به همراه آن بود طعم مطبوعي در شير ايجاد مي گردد.11 – باترميلک چگونه تهيه مي شود؟1 – يک لوله بزرگ و يا يک فلاسک شير بدون چربي پاستوريزه را با 1/0 حجم خود، از کشت خمير مايه تلقيح کنيد ما به تفقيح شدني را با چرخاندن لوله در بين دو دست و يا با تکان دادن فلاسک در تمام قسمت شير پخش کنيد.2 – شير تلقيح شده حاصل را تا وقت بعدي آزمايشگاهي در حرارت آزمايشگاه (روي ميز کار خود) بگذاريد.3 – شير ترش بدست آمده را تکان دهيد تا لخته هاي آن خرد شود، بو و مزه باترميلک کشت شده حاصل را مورد توجه قرار دهيد.فصل هشتم قارچها (کپکها – مخمرها)1 – کپک را تعريف کنيد؟اگر کپکها با يک ذره بين ساده مورد برسي قرار گيرند، توده اي رشته شاخه شاخه و در هم مشاهده مي شود که ميسليوم کپک ناميده مي شوند. بيشتر ميسليومهاي يک کپک در داخل و يا در سطح محيط کشت رشد کرده، مواد غذايي لازم را جذب مي کنند.2 – مخمرها را تعريف کنيد؟مخمرها قارچهاي تک سلولي هستند و با کپکها ارتباط نزديکي دارند. سلول مخمرها، شبيه گوي، تخم مرغي و يا استوانه اي بوده از نظر اندازه چندين بار بزرگتر از سلول باکتريهاي متوسط و تقريباً به اندازه هيف کپکها مي باشند. هسته مخمرها را هم مي توان با رنگ آميزي هاي مخصوص مثل رنگ آميزي فولکن مشاهده کرد.3 – ميسليوم فيکوميستها را تعريف کنيد؟ميسليوم روينده فيکوميستها کوانوستيک، يا بي جدار ( بدون ديواره مياني) است و تشکيل شده از يک ديواره پروتوپلاسم چند هسته اي که در ميان يک ساختمان لوله اي شکل که از ديواره سلولي کپکها ساخته شده ، قرار گرفته است.در ميسليوم روينده کپکها يک ساختمان ساقه اي شکل منشعب مي شود که حامل اسپورهاي غيرجنسي بوده و ابتدائي ترين وسيله توليد مثل کپکها به حساب مي آيد. اين اسپورها به مقدار زياد توليد شده ، بوسيله جريان هوا در فواصل دور و نزديک پخش مي شوند. هر کدام از اين اسپورها، اگر در محيط مناسبي قرار گيرند مي توانند تبديل به يک کپک کامل و بالغ شوند.فيکوميستها داراي اسپورانژ يا اسپور غيرجنسي مخصوصي هستند که در محفظه مخصوص اسپور که اسپورانژ خوانده مي شود قرار گرفته اند.4 – وضعيت ظاهر مخمرها را توضيح دهيد؟بيشتر مخمرها بوسيله عمل غيرجنسي جوانه زدن توليد مثل مي کنند، بدين ترتيب که از سلول اصلي يک قسم تبه صورت جوانه خارج شده، بعد از کامل شدن به صورت يک سلول دختر از آن جدا مي شود. در بعضي از مخمرهاي حقيقي توليد مثل جنسي صورت مي گيرد، بدين طريق که ابتدا دو اسکوسپور با يکديگر ترکيب شده، يک سلول روينده ديپلوئيد توليد مي کنند. هسته هاي حاصل اي سلول به چهار هسته يا بيشتر تقسيم شده هر يک از اين هسته ها بعد از کامل شدن به يک اسکوسپور تبديل مي گردد و اطراف آنها با مواد ذخيره اي و يک پوشش اسپوري احاطه مي شود. اسکوسپورها در سلول اصلي يا اسکوس باقيمانده و پس از پاره شدن آزاد مي شوند. اسکوسپورها در شرايط مناسب دوباره ترکيب شده، با جوانه زدن به سلولهاي روينده تبديل مي شوند و بدين طريق دور توليد مثل آنها تکرار مي شود.5- براي طبقه بندي و شناسايي کپکها از چه فاکتورهايي استفاده مي شود؟کپکها از روي نحوه توليد مثل آنها بررسي و طبقه بندي مي کنند. براي مطالعه کپکها از تفاوتهاي1) کلني کپکها2) ميسليوم روينده و جوان3) ساختمانهاي مخصوص توليد مثل چه جنسي و چه غيرجنسي استفاده مي کنيم.6 – چگونه مي توانيد يک محفظه مرطوب براي کشت کپکها بسازيد؟1 – يک تشک پتري که کف آن را يک کاغذ صافي پوشانده است استريل کنيد.2 – يک لام شيشه اي تميز را در الکل فرو برده ، از مقابل شعله عبور دهيد تا تمام الکل بسوزد، سپس آن را روي کاغذ صافي داخل تشتک پتري قرار دهيد.3 – بعد از خنک شدن لام به کمک يک پيپت و در شرايط استيپک يک قطره محيط گلوکز ژلوزه ذوب شده را در سطح لام بگذاريد و اجازه دهيد تا سخت شود.4 – با بکار بردن يک حلقه تلقيح استريل ، يک لبه از ژلوز را ببريد تا ژلوز داراي سطح صافي شود.5 – اين سطح صاف را با کپک تلقيح کنيد.6 – يک لامل استريل روي قطره ژلوز بگذاريد7 – با يک برس کوچک سه طرف لامل را به کمک پارافين مايع بسته ، طرف چهارم را براي عبور جريان هوا باز بگذاريد.8 – مقدار 1 تا 2 ميلي ليتر آب استريل روي کاغذ صافي داخل تشک بريزيد تا در حين رشد محيط مرطوب باشد.7 – زيگوسپور را تعريف کنيد؟در بعضي از گونه هاي فيلکوميستها اسپور جنسي تشکيل شده که به نام زيگوسپور خوانده مي شود، به صورت منفرد و بدون پوشش است در حاليکه در اسکوميستها، اين اسپور که به نام اسکوسپور ناميده مي شود چند عدد است و در محفظه اي که شبيه کيسه است و اسکوس خوانده مي شود، تشکيل مي شود.فصل نهم«آزمايشهاي ميکروبي برخي از مواد غذايي پرمصرف»1 – چرا آب موجب مسموميت غذايي مصرف کننده مي شود؟در صنايع غذايي آب داراي اهميت بسيار زيادي است. از آب براي شست و شوي مواد اوليه ، جا به جايي پاره اي از مواد اوليه، شست و شوي محيط کار، سردکردن قوطيها در کنسرو سازي و موارد زياد ديگري، استفاده مي شود. در پاره اي از موارد، از آب به عنوان بخشي از فرمول فرآورده ها استفاده مي شود. به همين علت ممکن است موجب مسموميت غذايي مصرف کننده فرآورده ها و فساد شود.2 – شمارش هر يک از مواد تعداد کل ميکروبهاي زنده، کليفرمها، استرپتوکوک فعال و کلسترويديوم پرفرنژان يا ولشاي در آب، به چه منظور انجام مي گيرد؟- شمارش تعداد کل ميکروبهاي زنده: براي ارزيابي وضع بهداشتي آب انجام مي گيرد، و اگر تعداد آنها از حد معيي تجاوز کند آب غيرقابل شرب و مصرف در صنايع غذايي خواهد بود.- شمارش کلستريديوم ولشاي: وجود اين باکتري در آب دليل آلودگي دور زمان آن با موضوع است، زيرا باکتري اسپرسازدست و اسپر آن تا مدتها در آب زنده مي ماند.- شمارش استرپتوکوک فعال: اين باکتري، نسبت به کليفرمها در برابر کلرو ترکيبات آن مقاومتر است، و در آب کلريته شده ، حضور آن دليل به کافي نبودن فرايند کلرزني است.3 – نمونه برداري از آب براي آزمايشهاي ميکروبي را توضيح دهيد؟اين کار بايد از سوي افراد ورزيده و آشنا به اصول ميکروبيولوژي انجام گيرد، تا از آلودگي ثانوي نمونه و تکثير باکتريهاي موجود در آب قبل از انجام آزمايش جلوگيري شود. براي نمونه برداري آب از شيشه هاي 100 تا 200 ميلي ليتري دردار استفاده مي شود. شيشه ها بايد پيش از نمونه برداري، سترون شده ، در ورقه هاي آلومينيومي يا کاغذي پيچيده و بسته بندي شده باشد. چنانچه نمونه برداري از شير آب انجام مي گيرد، لازم است سطح خارجي شير آب بوسيله الکل سترون شود يا با آتش زدن پنبه آغشته به الکل و گرفتن آن زير شير آب، اين کار انجام گيرد و پس از آن شير آب براي مدت 5 تا 10 دقيقه بازگذاشته شود تا نمونه واقعي تري به دست آيد. پس از طي اين مدت، در شيشه ويژه نمونه برداري با دست ضدعفوني شده، باز مي شود و از آب شير پر مي گردد. آنگاه در شيشه تهيه شده، در داخل ظرف ويژه حمل نمونه به آزمايشگاه يا يخدان قرار داده مي شود و اطراف با يخ پوشانده شود تا بلافاصله سرد شده، از تکثير باکتريها جلوگيري به عمل آيد.4 – روش شمارش تعداد کل ميکروبهاي موجود در آب را شرح دهيد؟براي اين منظور، ابتدا پنج عدد لوله يا شيشه حدود 25 ميلي ليتري هر يک محتوي نه ميلي متر مايع رقيق کننده مانند محلول آب پيتونه با فردار يا محلول رينگر را برداشته ، با آنها نمونه آب را تا رقيق مي کنيم و همرمان پنج عدد پليت استريل را نيز علامت گذاري کرده، به ترتيب به هر يک از آنها يک ميلي ليتر از رقت مربوط را ( - اضافه مي کنيم و روي هر يک از آنها تا پانزده ميلي ليتر از محيط کشت غذايي آگار که از پيش آماده شده، سترون و تا حدود C ْ45 سرد گرديده است مي ريزيم و آنها را به حال آرام در جهت عقربه هاي ساعت و بر خلاف آن، به سمت بالا و پائين مي چرخانيم سرانجام پليتها را به حال خود قرار مي دهيم تا آگار سفت شود، لبه پليتها را در دماي C ْ25 قرار مي دهيم . پس از 24 ساعت کلينهاي ظاهر شده روي پليتها را شمارش مي کنيم. پليتهايي که روي آنها بيش از 300 کلني رشد کرده ، غير قابل شمارش گزارش مي کنيم. ار روي رقتهاي تهيه شده در اين آزمايش و تعداد کلنيهايي که روي پليتهاي هر رقت رشد کرده، بسادگي مي توان به تعداد کل ميکروبها در آب پي برد.5 – آزمايش احياي رنگ به چه اصلي استوار است؟براين اصل استوار است که ميکروبهاي موجود در شير با رشد و نمو خود مقداري از اکسيژن موجود در شير را به مصرف رسانده، در نتيجه بر روي قدرت اکسيداسيون و احياي محيط تأثير مي گذارند و با احياي مواد رنگي موجب تغيير رنگ محيط مي گردند، اين واکنشها سريع است و راه ساده اي را براي تشخيص وضعيت ميکروبي شير در دسترس قرار مي دهند.6 – مزاياي آزمايش احياي رنگ را نام ببريد؟1 – سهولت انجام2 – سرعت عمل درستيابي به نتيجه3 – امکان انجام همزما چند نمونه4 – هزينه پايين انجام آزمايش5 – عدم دخالت توده هاي ميکروبي7 – معايت احياي رنگ را بنويسيد؟1 – پاسخ بدست آمده مربوط به باکتريهاي هوازي است.2 – دخالت مرحله رشد باکتريها در نتيجه آزمايش3 – متغير بودن زمان تکثير باکتريها در طي آزمايش4 – دخالت عوامل ضد ميکروبي مانند آنتي بيوتيکها5 – دخالت متغيرهايي مانند نور و مقدار چربي در آزمايشادامه سوالات فصل 98 – روش تهيه متيلن بلو را شرح دهيد؟براي تهيه اين محلول، لازم است 200 ميلي ليتر آب مقطر سترون و گرم را در شيشه رنگي مناسب ريخته، يک عدد قرص متيلن بلوي استاندارد در آن انداخت. قرصهاي استاندارد متيلن بلو داراي 19 ميلي گرم رنگ متيلن بلوري استاندارد است. پس از حل شدن قرص در آب مقطر، بايد آن را در جاي خنک و تاريک مانند يخچال قرار داد. محلول تهيه شده تا حدود يک هفته قابل نگهداري است.9 - مراحل آزمايش ميکروبي شير خشک را توضيح دهيد؟نمونه برداري از بهرهاي بسته بندي شده بايد با استفاده از روش استاندارد جمهوري اسلامي ايران به شماره 2836 يا جداول مناسب ديگر انجام گيرد، پس از انجام اي مرحله مي توان بسته ها را جداگانه مورد آزمايش ميکروبي قرار داد و چنانچه اين کار به دلايلي مشکل باشد بايد از تمام بسته هايي که به عنوان نمونه انتخاب شده اند نمونه برداري شود و نمونه ها با همديگر مخلوط شده، پس از همگن شدن نمونه اوليه، نمونه مورد آزمايش از آن برداشته شود.10 – ويژگي باسيلوس سرئوس را شرح دهيد؟گونه اي باکتري مقاوم نسبت به گرما، هوازي و هوازي اختياري، اسپرساز، گرم مثبت، باسيل کوتاه با انتهاي مربع شکل است که به صورت زنجير کوتاه تا دراز ديده مي شود. دماي مناسب براي شد آن حدود 30 تا 37 C ْ است اما در دماهاي C ْ45 تا C ْ50 هم قادر به ادامه زيست بدون تکثير مي باشد، رشد آن بالاتر از 93/0 و PH مناسب براي رشد آن 9/4 تا 3/9 است، باکتري به سادگي تبديل به اسپر مي شود. اسپر بيضوي مياني يا متمايل به کناري است که ديواره اي نازک دارد. مسموميتهاي ناشي از اين باکتري بيشتر بر اثر مصرف غذاهاي پخته بويژه برنج که پس از پخت در شرايط جوانه زدن و رشد باکتري قرار گرفته باشند عارض مي شود.11 – آماده کردن نمونه باسيلوس سرئوس چگونه انجام مي گيرد؟براي آماده کردن نمونه، 25 گرم از آن را به مخلوط کن اضافه کرده، 225 گرم محلول آب پيتونه با فردار سترون شده روي آن مي ريزيم و با سرعت 15000 تا 20000 دور در دقيقه، بخوبي مخلوط و يکنواخت مي کنيم. سپس مخلوط حاصل را تا رقيق کرده، از هريک از رقتها 25/0 ميلي ليتر به دو پليت حاوي محيط کشت فنل رد محتواي امولسيون زرده تخم مرغ و پلي ميکسين اضافه کرده، با ميله شيشه اي سترون بخوبي روي سطح پليت حاوي محيط کشت فنل رد محتواي امولسيون زرده تخم مرغ و پلي ميکسين اضافه کرده، با ميله شيشه اي سترون بخوبي روي سطح پليت پخش مي کنيم و در گرمخانه C ْ30 قرار داده، 24 ساعت بعد پرگنه هاي ظاهر شده روي پليت را مي شماريم و در هر مورد ميانگين پرگنه هاي روي دو پليت را در عکس رقت آن ضرب مي کنيم تا تعداد شمارش شود.12 – مجموعه ميکروبي آرد را نام ببريد؟مجموعه ميکروبي آرد را فلور ميکروبي اوليه و عوامل آلوده کننده طي مراحل گوناگون شامل باکتريهاي هوازي، هوازي اختياري، بي هوازي اختياري، اسپرسازها، کپکها و مخمرها و ساير گونه هاي ميکروبها تشکيل مي دهند.13 – نمونه برداري از بدن ماهي به چند طريق انجام مي گيرد؟يکي روش شست و شوي سطح بدن ماهي است که براي ماهي درسته با شکم خالي يا پر و با وزن کمتر از 2 کيلوگرم يا فيله ماهي انجام مي گيرد. براي اين منظور ابتدا با ابزارهاي مناسب پولکهاي ماهي را جدا کرده، نمونه را در کيسه نايلوني محکم و سترون قرار مي دهيم و 500 ميلي ليتر محلول1/0 درصد آب پپتونه سترون به آن اضافه نموده تا سر حد امکان هواي کيسه را خالي مي کنيم. آنگاه، براي مدت دو دقيقه آن را به شدت ماساژ داده، تکان مي دهيم. در اين مرحله تمام سطح بدن ماهي بايد ماساژ داده شود تا ميکروبهاي تمام قسمتهاي سطح بدن ماهي جدا شود. - روش نمونه برداري با پنبه سترون دسته دار، در اين روش يک پنبه سترون از جنس آلژينات کلسيم را در محلول رقيق کننده خيس کرده، بخوبي روي سطحي معادل 10 سانتي متر مربع از بدن ماهي بماليد. سپس پنبه دسته دار را وارد لوله آزمايش حاوي مايع رقيق کننده کرده، از حدود 5/0 سانتي متري بالاي قسمت پنبه پيچ شده بکشنيد و سپس از ورود آن به داخل محلول رقيق کننده، حدود 5 بار آن را به شدت تکان دهيد.14– روش نمونه برداري از گوشت عضله ماهي را شرح دهيد؟روش اول – قسمتي از بدن ماهي را با صفحه فلزي داغ سترون نموده، ابعاد معيني از آن را بريده، وارد محلول رقيق کننده مي کنيم و به وسيله مخلوط کن برقي آن را يکنواخت کرده، از آن نمونه بر مي داريم. روش دوم : سطح بدن ماهي را به وسيله پنبه دسته دار خيس شده در الکل سترون کرده يا مقداري الکل روي آن ريخته، آتش مي زنيم. بدين ترتيب بدون داغ شدن گوشت ماهي سطح آن سترون مي شود. سپس قسمتي از آن را ، به طول و عرض 4 و عمق 2 سانتي متر، بريده، داخل محلول رقيق کننده ريخته، به وسيله مخلوط کن برقي يکنواخت مي کنيم.15– نمونه برداري از قوطيهاي بادکرده چگونه انجام مي شود؟ابتدا يک تشت انتخاب نموده، مقداري آب حاوي مواد ضدعفوني کننده در آن مي ريزيم بعد سطح قوطي مورد نظر براي آزمايش را سترون نموده، روي آن يک قيف سترون متناسب با قطر قوطي قرار مي دهيم. بعد از سوراخ قيف يک ميله نوک تيز يا ميخ نوک تيز سترون وارد کرده، به وسيله چکش يا ابراز مناسب ديگر روي در را سوراخ مي کنيم تا گازهاي قوطي خارج شود. در اين مرحله، لازم است قوطي طوري نگه داشته شود که محتواي آن از راه سوراخ قيف به بيروت پرت نشود و براحتي به داخل تشت بريزد. پس از اين عمل، بر روي در قوطي سوراخ کوچکي ايجاد نموده، از راه آن نمونه برداري را انجام مي دهيم.16– منشأ باکتري سالمونلا در کجاست و بيشتر در کجا يافت مي شوند؟گونه هاي سالمونلا در خانواده آنتروباکتر يا سه قرار دارند، منشأ باکتري ، دستگاه گوارش انسان و حيوانات بويژه مرغ است. باکتريهاي اين جنس گرم منفي ، با سيلي شکل ، بدون اسپر، هوازي و هوازي اختياري و داراي حرکت هستند. دماي مناسب براي رشد آنها حدود C ْ37 است اما دماهاي 5/5 تا C ْ 45 را تحمل کرده ، به رشد کند خود ادامه مي دهد. سالمونلاها بيشتر از طريق آب آلوده، ميوه ها و سبزيها، گوشت طيور، گوشت قرمز ، تخم مرغ، شير و اندامهاي کسانيکه با مواد غذايي سرو کار دارند منتقل مي شوند.17– مرحله غني سازي در آزمايش سالمونلا را شرح دهيد؟در اين مرحله دو نمونه 25 گرمي از ماده غذايي مورد آزمايش را به طريق بدون آلودگي وزن کرده، به ظرف شيشه اي دردار با ظرفيتي حدود 500 گرم منتقل مي کنيم. سپس به يکي از آنها 225 ميلي ليتر تتراتيونات برات و به ديگري همين مقدار سلئت سيتئين برات اضافه مي نمائيم. اگر مقدار چربي نمونه زياد باشد بهتر است 6 ميلي ليتر محلول 10/0 ترژيتول به آن اضافه کنيم و پس از بستن در آن، محتويات بسته را به شدت به هم زده به مدت 24 ساعت در اتو C ْ 2 35 قرار دهيم18 – مرحله کشت روي پليت را در آزمايش سالمونلا توضيح دهيد؟براي اجراي اين مرحله يک لوپ پر از کشت مرحله غني سازي را برداشته، روي محيط هاي سالمونلا شيگلا آگارة، بيسمومت سولفيت آگار، بريان گرين آگار کشت مي دهيم. به نحويکه در صورت حضور سالمونلا در قسمتي از پليت کلينهاي مجزا تشکيل شود. پليتها را به مدت 24 ساعت در گرمخانهC ْ 1 35 قرار مي دهيم. پرگنه هاي سالمونلا روي محيط کشت سالمونلا شيگلا آگار معمولاً بيرنگ است. ممکن است پرگنه هاي قهوه اي روشن، صورتي روشن يا زرد هم تشکيل شود، پرگنه ها در شرايط نامساعد رشد و بعد از 24 ساعت ، حدود 5 ميلي ليتر يا بيشتر خطر دارند و مرکز آنها ممکن است به رنگ تيره باشد.19– مرحله تشخيص را در آزمايش سالمونلا توضيح دهيد؟براي تشخيص نهايي لازم است از هر يک از محيط هاي کشت SSA، BSA، BGA پنج پرگنه مشخص و مشکوک را از روي سطح آگار برداشته، در عمق و روي سطح محيط تريپل شوگرآيرون آگار که به صورت خوابيده در لوله آزمايش قرار دارد، کشت داد. و در گرمخانه C ْ 2 35 گذاشت. در صورت رشد سالمونلا در محيط TSI در قسمت شيب دار آن رنگ مايل به ارغواني ايجاد مي شود که مربوط به قليايي شدن محيط است. در قسمت مياني محيط، بر اثر اسيدي شدن آن، رنگ زرد حاصل مي شود. قسمت عمقي محيط هم به علت سنتز SH2 تيره رنگ مي شود.20-رحله تأييد را در آزمايش سالمونلا شرح دهيد؟در اين مرحله ، ابتدا با مقداري TSI که باکتري روي آن رشد کرده، مقداري سرم فيزيولوژي يک سوسپانسيون ميکروبي تهيه مي کنيم و بعد آن را با يک قطره سرم پلي والان مخلوط کرده، با چشم غيرمسلح تشکيل يا تشکيل نشدن لخته و انعقاد را مشاده مي نمائيم.21- گونه هاي استافيلوکوک طلائي، کوآگولاز مثبت جزء کدام دسته از باکتريها هستند؟باکتريهايي هستند هوازي تا هوازي اختياري بدون حرکت و داراي تجمع خوشه اي ، توده اي زنجيره ي کوتاه و کوکسي شکل و گرم و مثبت، که نقش مهمي در مسموميتهاي غذايي دارند. زيرا قادرند سموم و آنزيمهاي زيادي سنتز کرده، بوسيله آنها سلامت مصرف کنندگان فراورده هاي غذايي را به خطر بيندازند. اين باکتريها به سادگي بر روي دست و دهان و بيني رشد کرده، جزو فلور طبيعي اين اندامها هستند و از اين طريق وارد مواد غذايي مي شود.Salmonella                سالمونلاسالمونلا ازطریق دهان وارد روده انسان  حیوانات وپرندگان می شود وسبب مسمومیتهای غذایی - سپتی سمی وتب روده ای (حصبه یا تیفوئید)می گردداین باکتری باسیل گرم منفی - بدون اسپور - فاقد کپسول - متحرک ودارای فلازل پری تریش است . در این جنس فقط سالمونلا گالیناروم وپولوروم بدون حرکت می باشند . سالمونلا ها هوازی و بی هوازی اختیاری هستندتشخیص آزمایشگاهیبررسی میکروسکوپی مستقیمدر عفونت گاستروآنتریت سالمونلایی درصورتیکه اسمیر مستقیم مدفوع بررسی شود گلبولهای سفید درمدفوع اسهالی دیده می شودکشتبرای تشخیص تب تیفوئیدی قبل از تجویز آنتی بیوتیک از بیمار نمونه جهت انجام کشت باید گرفته شودانواع محیط کشتمحیطهای مغذی: مانند آگار خوندار کلنیهای سالمونلا اغلب بزرگ به قطر2 تا 3 میلیمتر به رنگ خاکستری باسطح محدب ومرطوب پس از 24ساعت در دمای37درجه سانتیگراد دیده می شود .محیطهای انتخابی : مانند محیطهای کشت بریلیانت گرین, بیسموت سولفیت ,HEA - SS این محیطها مانع رشد کلی فرمها می گردد وسالمونلاهادر این محیط ها رشد می کنندXLDمحیطهای انتخابی وافتراقی : مانند محیطهای مک کانکی, محیطEMB وDCA(دزوکسی کولات سیترات) کلنیهایی که روی این محیطها نمایان می شوند به علت عدم تخمیر لاکتوز بی رنگندمحیطهای غنی کننده : مانند محیط سلنیتF , محیط مایعGN این محیطها از رشد باکتریهای گرم مثبت جلوگیری به عمل آورده و سرعت تکثیر سالمونلا و شیگلا دراین محیطها افزایش پیدا می کندالف) کشت مدفوع :روش کار :نمونه مشکوک رابروی محیط مک کانکی یا EMB وSS وهمچنین بروی محیطهای غنی کننده مانند سلنیتF یاGN بریلیانت گرین - بیسموت سولفیت آگار کشت داده و دردمای 37درجه سانتیگراد به مدت 24ساعت نگهداری کنید .در روزبعد ازمحیطهای سلنیتFیاGNنیز بر روی محیطهای کشت مناسب رپیلیکاز داده می شود .از کلنیهای مشکوک (بی رنگ)وSH2دار می توان جهت تستهای بیوشیمیایی استفاده کرد .برای تشخیص باید از کلنیهای سالمونلا بر روی محیطهای کلیگر کشت داد که پس از 24ساعت به صورت آلکالن-اسید(تخمیر لاکتوز منفی وتخمیر گلوکز مثبت)ظاهر می شودتمام سالمونلاها بجز پاراتیفی Aدرمحیط کلیگر ایجاد SH2 وتست اوره درسالمونلا منفی است وتست IMVIC درمورد سالمونلا تیفی و پاراتیفی Aبه صورت از چب به راست --+- ودر سالمونلا پاراتیفی B وC وتافی موریوم به صورت +-+- است .نکته: سالمونلاتیفی در صورت مزمن شدن معمولا درکیسه صفرا کولونیزه شده وتکثیر پیدا می کند  واز طریق مدفوع دفع میشود لذا در موارد مزمن می توان سالمونلا راازکشت مدفوع جدا کردبرای حصول نتیجه بهتر باید هنگام آزمایش از مسهل نمکی استفاده کرد تا کیسه صفرا تخلیه گرددنکته : درموارد مشکوک به تب تیفوئیدی ازخون بیمارجهت انجام کشت نمونه گرفته می شود ودرعفونتهای گاستروآنتریت نمونه مدفوع جهت کشت استفاده می شودروش انجام تست : برای انجام تست سرولوزیک باید ازباکتری موردآزمایش شیرابه یکنواختی در سرم فیزیولوزی  تهیه کرد وسپس یک قطره از آنرا با یک قطره آنتی سرم o(آنتی زن سوماتیک) روی لام شیشهای مخلوط نمود بروز آگلوتیناسیون قابل مشاهده با چشم غیر مسلح پس از یک تا دودقیقه تست مثبت رانشان می دهد .نکته : اگر باکتری با هیچ یک از آنتی سرمهای oآگلوتیناسیون ندهد دلیل بروجود آنتی زن کپسولی یا آنتی زنVi ذرسالمونلا تیفی -سالمونلا آنتریدیس وپاراتیفی cاست که روی آنتی زن سوماتیک را پو شانده استب) کشت خون :برای کشت خون در حدود10میلی لیتر ازخون بیمار رادرهنگام تب گرفته ودر محیطtrypticase  soy Brothتلقیح کرده برای مدت 24 ساعت در دمای 37 درجه سانتیگراد نگهداری نمایید وسپس به محیط کشت جامد منتقل کنید و توسط تستهای بیوشیمیایی کلنی مشکوک را بررسی کنید . در موارد تب تیفوئیدی در90 درصد ازموارد کشت خون درهفته اول بیماری مثبت استج)کشت ادرار :برای کشت ادرار باید ادرار رادر دور 2500تا3000 به مدت 20 تا 30 دقیقه سانتریفوز کنید و سپس مایع روی را دور ریخته و به وسیله آنس از رسوب ته لوله نمونه برداری کنید . در سطح پلیتهای حاوی محیط کشت جامد ودرمحیط سلنیتfکشت داده و همچنین تستهای بیوشیمیایی را نیز انجام دادنکته : تولید SH2 در سالمونلا تیفی به شکل حلقه یالکه سیاهرنگ درحدفاصل  قسمت شیبدار وبخش استوانه محیط کلیگرآیرون آگار دیده می شود .نکته : سالمونلا تیفی برروی محیط بیسموت سولفیت آگار (ویلسون-بلر) کلنیهای سیاه با جلای فلزی ایجاد می کند .نکته : برای افتراق سالمونلا از سیتروباکتر از تست لیزین استفاده می شود (سالمونلا LDC+وLDA - می باشد)

بررسي نحوه بهره برداري از دستگاههاي كلرزني به عنوان روشی جهت گندزدائي آب شرب - شنبه پنجم تیر ۱۳۹۵
آب شرب سالم - شنبه پنجم تیر ۱۳۹۵
بهداشت محيط در انبارها - شنبه پنجم تیر ۱۳۹۵
بهسازی چشمه هاي آب آشاميدني - شنبه پنجم تیر ۱۳۹۵
چک لیست ایمنی آزمایشگاه - شنبه پنجم تیر ۱۳۹۵
استاندارد ها و نشریه های آب و فاضلاب - شنبه پنجم تیر ۱۳۹۵
آموزش نرم افزار Hec-RAS - شنبه پنجم تیر ۱۳۹۵
آموزش نرم افزار Hec-HMS - شنبه پنجم تیر ۱۳۹۵
5طبقه بندی باکتری ها از دیدگاه میکروبیولوژی مواد غذایی - شنبه پنجم تیر ۱۳۹۵
مدل سازي اطلاعات ساختمان در طراحي ساختمان - شنبه پنجم تیر ۱۳۹۵
مروری بر مطالعات مدل‌سازی اطلاعات ساختمان در ایران - شنبه پنجم تیر ۱۳۹۵
مقدمه ای بر کاربرد مدل سازی اطلاعات ساختمان درمدیریت پروژه های ساخت - شنبه پنجم تیر ۱۳۹۵
به کارگیری مدل سازی اطلاعات ساختمان جهت دستیابی به ساخت و ساز ناب - شنبه پنجم تیر ۱۳۹۵
مقدمه ای بر استفاده از مدل سازی اطلاعات ساختمان در مدیریت بهره برداری و نگهداری ساختمان ها - شنبه پنجم تیر ۱۳۹۵
کاربرد مدل سازی اطلاعات ساختمان در فازاجرای پروژه های ساخت - شنبه پنجم تیر ۱۳۹۵
بررسی عملکردی مدل سازی اطلاعات ساختمان(BIM) - شنبه پنجم تیر ۱۳۹۵
پتانسیل بکارگیری مدل سازی اطلاعات ساختمان در معماری ایرانی-اسلامی - شنبه پنجم تیر ۱۳۹۵
مروری بر فناوری اطلاعات و ارتباطات در مدیریت پروژه های ساختمان - شنبه پنجم تیر ۱۳۹۵
کاربرد مدل سازی اطلاعات ساختمان در فازاجرای پروژه های ساخت - شنبه پنجم تیر ۱۳۹۵
تولید برق از فاضلاب - دوشنبه هشتم تیر ۱۳۹۴
استفاده از لوح فشرده برای تصفیه آب - دوشنبه یکم تیر ۱۳۹۴
هر‌ آب بطری ‌شده‌ای معدنی نیست - جمعه بیست و دوم خرداد ۱۳۹۴
66 روش برای استفاده بهتر از آب - جمعه پانزدهم خرداد ۱۳۹۴
توصیفی اجمالی در مورد آب های زیر زمینی - جمعه هشتم خرداد ۱۳۹۴
نکات آب و فاضلابی - جمعه یکم خرداد ۱۳۹۴
خصوصیات باکترویلوژی آب آشامیدنی - سه شنبه بیست و دوم اردیبهشت ۱۳۹۴
اساس تصفیه فاضلاب - سه شنبه پانزدهم اردیبهشت ۱۳۹۴
مخزن جمع آوری آب در یزد - سه شنبه هشتم اردیبهشت ۱۳۹۴
طبقه بندي رزين - سه شنبه یکم اردیبهشت ۱۳۹۴
انواع زلالسازها - شنبه بیست و دوم فروردین ۱۳۹۴
سیستم تبادل یونی - شنبه پانزدهم فروردین ۱۳۹۴
فراوردهای جانبی گندزدایی - شنبه هشتم فروردین ۱۳۹۴
هدایت ویژه آب - شنبه یکم فروردین ۱۳۹۴
انعقاد آب - جمعه بیست و دوم اسفند ۱۳۹۳
مضرات کلر زیادی آب - جمعه پانزدهم اسفند ۱۳۹۳
اسمزمعکوس(RO) - جمعه هشتم اسفند ۱۳۹۳
فناوری نانو در شیرین کردن آب - جمعه یکم اسفند ۱۳۹۳
تصفیه خانه فاضلاب مرند - چهارشنبه بیست و دوم بهمن ۱۳۹۳
بررسی وضعیت استفاده از پساب در کشورهای مختلف - چهارشنبه پانزدهم بهمن ۱۳۹۳
کاربرد انواع فیلتر در تصفیه فاضلاب صنایع فلزی - چهارشنبه هشتم بهمن ۱۳۹۳
واحد کلرزنی - چهارشنبه یکم بهمن ۱۳۹۳
فیلترهای تحت فشار (Pressure filter) - دوشنبه بیست و دوم دی ۱۳۹۳
ناخالصی های آب - دوشنبه پانزدهم دی ۱۳۹۳
شیمی آب - دوشنبه هشتم دی ۱۳۹۳
سختی آب - دوشنبه یکم دی ۱۳۹۳
پمپ و پمپاژ - شنبه بیست و دوم آذر ۱۳۹۳
الکترو کلریناتور - شنبه پانزدهم آذر ۱۳۹۳
استانداردهاي خروجي فاضلاب - شنبه هشتم آذر ۱۳۹۳
آلاینده های آب وروشهای اندازه گیری کیفیت آب - شنبه یکم آذر ۱۳۹۳
سپتیک تانک - پنجشنبه بیست و دوم آبان

مرجع تخصصی آب و فاضلاب