آزمایش شمارش بشقابی هتروتروفیک

درحال مشاهده: آزمایش شمارش بشقابی هتروتروفیک

ادعونی اهدای خون

آزمایش شمارش بشقابی هتروتروفیک

۱۳۹۰/۰۶/۲۲

0:11

امیرحسین ستوده بیدختی

تئوری آزمایش:

اندازه گیری تراکم باکتریهای هتروتروف هوازی و بی هوازی اختیاری در آب به نام شمارش بشقابی هتروتروفیک نامیده می شود. (باکتری های هتروتروف انرژی خود را از طریق اکسیداسیون مواد آلی بدست می آورند همچنین مواد آلی به عنوان منبع کربن آنها می باشد). این روش، روش استاندارد شده ای است. به خاطر اینکه بازیافتن تمام باکتری های موجود در یک نمونه آب با یک روش منحصر امکان پذیر نیست. روش های جدید برای بهبود بازیافت جمعیت باکتریایی هتروترفیک گسترش یافته است و روش ها و محیط کشت های جدید شناخته شده است. روش های مختلفی در مورد HPC وجود دارند که به آنها می پردازیم:

1-5-2-روش پورپلیت

تئوری روش آزمایش:

در این روش محدوده حجم نمونه یا نمونه رقیق شده انتخابی بین 1/0 تا 2 میلی لیتر متغیر است. این روش دارای اشکالاتی است از جمله اینکه محیط حرارت دیده تا 44 الی 46 درجه سانتیگراد می تواند سبب شوک حرارتی و استرس برای باکتریها شود.

مواد و وسایل مورد نیاز:

1-محیط کشت R2A agar

2-پتری دیش (پلیت)

3-جا لوله ای ، لوله های آزمایش

4-چراغ الکلی، آنس یا لوپ، پیپت و پوآر

روش آزمایش:

1-محیط R2A agar را طبق دستورالعمل کارخانه سازنده تهیه می کنیم و در یخچال نگهداری می نماییم.

2-سپس این محیط ها را که بصورت جامد هستند در آب جوش بن ماری قرار داده تا محیط ها ذوب شود، سپس لوله ها را در بن ماری در دمای 45 تا 50 درجه سانتیگراد قرار می دهیم تاخنک تر شوند.

3-سپس در کنار شعله یک میلی لیتر از نمونه را وارد پتری دیش نموده و سپس محیط کشت را که قبلا ذوب شده است داخل پتری دیش ریخته و سپس به صورت عدد 8 انگلیسی به آهستگی حرکت داده تا نمونه و محیط کشت به خوبی مخلوط شوند، به این وسیله نمونه را در تمام سطح محیط پخش می کنیم.

4-پلیت ها را در 37 درجه سانتیگراد به مدت 24 تا 48 ساعت قرار می دهیم.

2-5-2-روش اسپرید پلیت

تئوری روش آزمایش:

در این روش شوک حرارتی ایجاد شده بوسیله آگار حرارت دیده وجود نداردو بعلاوه کلنی ها تماما در سطح آگار خواهد بود که به راحتی دیده می شوند و به سرعت می توان شمارش را انجام داده آنها را از ذرات یا حباب های هوا تشخیص داد. عامل محدود کننده کاربرد آن به کار رفتن حجم کمتری از نمونه یا نمونه رقیق شده است.

مواد و وسایل مورد نیاز:

1-محیط کشت R2A agar

2-پتری دیش (پلیت)، اسپریدر

3-جا لوله ای ، لوله های آزمایش

4--چراغ الکلی، آنس یا لوپ، پیپت و پوآر

روش آزمایش:

اساس این روش همانند روش قبل است با این تفاوت که نمونه را همراه محیط کشت نمی ریزیم.

1-ابتدا محیط کشت پس از تهیه و استریل در اتوکلاو در داخل پلیت ها ریخته می شود.

2-پس از سرد شدن محیط کشت، 1 سی سی از نمونه را به صورت کاملا استریل روی محیط کشت ریخته و سپس با اسپریدر[4] نمونه را در تمام سطح محیط کشت پخش می کنیم.

3-پلیت ها را در 37 درچه سانتیگراد به مدت 24 تا 48 ساعت قرار می دهیم.

شمارش و گزارش:

برای شمارش کلنی ها از واحد CFU یا واحد تشکیل کلنی استفاده می شود.

مرجع تخصصی آب و فاضلاب

موضوعات مرتبط: میکروبیولوژی,تصفیه بیولوژیک و زیستی آب و فاضلاب

برچسب‌ها: میکروبیولوژی , آزمایش

ادامه مطلب

مرجع تخصصی آب و فاضلاب

درحال مشاهده: آزمایش شمارش بشقابی هتروتروفیک

آزمایش شمارش بشقابی هتروتروفیک

لیست مطالب

آرشیو موضوعی

برچسب ها

صفحات مهم

لینک دوستان

پیوندها

نویسندگان

آخرین مطالب

آرشیو